产品信息：
Nalm-6-LUC-puro 是 Nalm-6 细胞的基因工程改造株，稳定表达荧光素酶（Luciferase, LUC）和嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因。它保留了亲本细胞的生物学特性，同时具备了活体成像和药物筛选的能力，是血液肿瘤研究、药物疗效评估及异种移植模型构建的理想工具。
细胞基本信息
亲本来源：Nalm-6 (人前B急性淋巴细胞白血病细胞)
种属来源：人（Homo sapiens）
供体信息：19岁男性，急性淋巴细胞白血病（ALL）
产品名称 | 人B淋巴白血病细胞+LUC;Nalm6-LUC-puro | 英文名称 | Nalm6-LUC-puro：Nalm6LUCpuro |
货号 | AXB10672 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
标记基因：
LUC：荧光素酶，用于生物发光成像（需底物荧光素）。
Puro：嘌呤霉素抗性基因，用于筛选和维持质粒。
培养基：RPMI-1640 + 10% FBS
细胞特性与应用
特征维度 详细描述
背景简介 通过慢病毒转染，将 LUC 和 Puro 基因导入 Nalm-6 细胞，筛选得到的稳定株。
荧光特性：该细胞通常不表达荧光蛋白（如 GFP），仅表达荧光素酶。因此在普通显微镜下无自发荧光，需通过生物发光成像（IVIS）检测。
抗性维持：培养基中通常需要添加 Puromycin (嘌呤霉素) 以维持荧光素酶标记的稳定表达。
主要应用：1. 白血病异种移植模型（如 NSG 小鼠）构建。
CAR-T 或药物体内杀伤活性评估（通过生物发光强度评估肿瘤负荷）。
微小残留病灶（MRD）检测研究。
推荐培养体系
基础培养基：RPMI-1640
血清添加：10% 胎牛血清 (FBS)（建议使用优质胎牛血清）
双抗添加：1% 青霉素-链霉素 (P/S)
筛选压力：Puromycin (嘌呤霉素)（通常添加浓度为 1-2 μg/mL，具体请参考构建说明书）
培养环境：
温度：37℃
气体环境：95% 空气 + 5% CO
湿度：维持培养箱内湿度 >90%。
详细培养操作指南
1. 细胞复苏 (Thawing)
预热：将水浴锅调至 37℃，预热完全培养基。
解冻：从液氮中取出冻存管，迅速放入 37℃ 水浴中，1-2 分钟内快速摇晃融化。
转移：用 75% 酒精擦拭冻存管外壁消毒，转入超净台。
稀释：将细胞悬液缓慢加入含有 4-6 mL 预热完全培养基的离心管中（稀释 DMSO 毒性）。
离心：1000 rpm (约 250g) 离心 5 分钟。
接种：弃上清，加入新鲜完全培养基（含 Puromycin）重悬，接种至 T25 培养瓶中，放入培养箱静置培养。
细胞传代 (Passage)
Nalm-6-LUC-puro 为悬浮细胞。
观察：当细胞密度达到 0.8-1.0 × 10 cells/mL 时进行传代。
收集：直接将培养瓶中的细胞悬液转移至离心管中。
离心：1000 rpm 离心 5 分钟，弃上清。
重悬与分瓶：
方法一（离心换液）：加入新鲜完全培养基重悬，按 1:2 到 1:3 的比例分装到新的培养瓶中（推荐，可去除代谢废物）。
方法二（半量换液）：若细胞密度极高，可直接吸取一半细胞悬液弃去或传代，补充等量新鲜完全培养基。
注意事项：该细胞在高密度时容易聚团，吹打时需用力均匀，确保细胞分散成单细胞悬液，以便准确计数。
细胞冻存 (Freezing)
状态选择：待细胞生长状态良好时进行冻存。
消化：弃去培养基，加入少量胰酶消化（虽然主要为悬浮，但可能有少量贴壁），待细胞完全脱落。
收集：加入含血清的培养基终止消化，混匀后转移至离心管。
离心：1000 rpm 离心 5-10 分钟，弃上清。
重悬：加入配置好的冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）重悬细胞。
分装：转移至冻存管中，放入程序降温盒（-80℃ 过夜），随后转入液氮罐长期保存。
关键注意事项
悬浮特性：该细胞在培养瓶中呈悬浮状态，呈圆形，单个或小团簇状生长。不要使用胰酶消化进行传代（除非细胞发生异常贴壁），正常传代只需离心收集并重悬即可。
抗性维持：为了防止 LUC 基因丢失，建议在培养基中持续添加 Puromycin。若用于动物实验接种，需确认动物体内无抗生素干扰。
无自发荧光：请注意，该细胞通常不表达 GFP/RFP 等自发荧光蛋白，仅表达荧光素酶。因此在普通荧光显微镜下无法直接看到荧光，需通过加入底物进行活体成像或裂解后进行荧光素酶活性检测。
运输脱落：由于是悬浮细胞，运输途中细胞会悬浮在培养基中。收到后请先观察是否有沉淀或漂浮，若有沉淀可离心收集，若悬浮良好可直接计数调整密度后培养。
支原体检测：建议定期检测支原体，确保细胞无污染。
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细胞类型与特性原代细胞：直接从组织中分离的细胞，通常指第1-10代细胞，具有接近体内状态的特性。
细胞系：原代细胞首次传代成功后形成的细胞群，可连续传代。
细胞株：从原代培养或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞，通常为第10-50代。
根据生长方式分为：
贴壁细胞：需附着在培养瓶表面生长，如成纤维细胞、上皮细胞。
悬浮细胞：在培养基中自由悬浮生长，如血液细胞。
半贴壁半悬浮细胞：兼具贴壁和悬浮生长特性。
关键字： Nalm6-LUC-puro;人B淋巴白血病细胞+LUC;贴壁细胞;
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