鲍鱼立克次氏体病（XC）检测试剂盒（荧光PCR法）
试剂简介：
1.1 病原体特征
分类学：α-变形菌纲，立克次氏体科（Rickettsiaceae），专性胞内寄生
靶基因选择：
gltA基因（柠檬酸合成酶，属保守标记）
sca4基因（外膜蛋白，种特异性）
产品名称 | 鲍鱼立克次氏体病（XC）检测试剂盒（荧光PCR法） | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1585 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
宿主范围：
主要感染皱纹盘鲍（Haliotis discus hannai）
通过水体传播，致死率可达80%（幼鲍阶段）
1.2 技术优势
四重检测体系：
FAM：gltA（属水平检测）
HEX：sca4（XC特异性）
CY5：鲍鱼EF-1α内参
ROX：过程控制（噬菌体phiR1L37）
灵敏度：10拷贝/μL（比传统PCR高100倍）
二、试剂盒组成与样本处理
2.1 核心组分（48测试/盒）
组分 技术特性
核酸提取试剂 含溶菌酶+CTAB的革兰阴性菌破壁系统（适配鲍鱼粘液样本）
PCR预混液 含抗多糖抑制因子（针对鲍鱼软组织高糖特性）
引物探针组 四通道设计（兼容ABI 7500/LightCycler 480等机型）
质控品 灭活XC-HN2023株（阳性）、SPF鲍肝胰腺提取物（阴性）
2.2 样本采集规范
最佳样本：
濒死鲍：肝胰腺（病毒载量最高）
无症状鲍：鳃丝或足部粘液
保存运输：
RNA保护液（如RNAlater）中4℃保存≤48h
远程运输需液氮速冻
三、标准化检测流程
3.1 操作步骤（全程约3.5小时）
核酸提取：
组织匀浆：50mg肝胰腺+1mL裂解液（含β-巯基乙醇）
磁珠法纯化（30μL洗脱体积）
qPCR扩增：
反应体系（25μL）：
预混液12.5μL + 探针混合液2μL + 模板5μL + 无核酸酶水5.5μL
循环程序：
95℃ 5min → 45×[95℃ 15sec → 60℃ 45sec]（四通道采集）
3.2 结果判读标准
通道 Ct值范围 判定依据
FAM(gltA) ≤35 立克次氏体属感染
HEX(sca4) ≤35 XC特异性感染确诊
CY5(内参) 22-28 样本质量合格
ROX(过程) 30±2 提取效率正常
四、质量控制与技术创新
4.1 质控要点
抑制物监控：ROX通道Ct值>35需稀释复测
交叉验证：
阳性样本建议吉姆萨染色（胞内紫色包涵体）
临界值样本需测序确认（sca4基因）
4.2 2025年升级
微流控快检版：
集成提取与检测（1.5小时完成）
适配养殖场现场使用
数字PCR定量：
科研版可检测102%的隐性感染
五、应用与生物安全
5.1 典型场景
育苗场监测：
亲鲍检疫（鳃拭子筛查）
饵料生物风险管控
流行病学研究：
不同地理株sca4基因变异分析
5.2 注意事项
灭活处理：阳性样本需121℃高压30分钟
引物更新：
每年比对GenBank新毒株（如2024年XC-JZ变异株）
公司正在出售的产品：
甘油-3-磷酸脱氢酶1样抗体 | 细菌结晶紫选择琼脂平板 |
组织相容性复合体2抗体 | P38蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶H2抗体 | 人体血液正铁白蛋白（methemalbumin）含量比色法定量检测试剂盒 |
酪蛋白硫酸转移酶2抗体 | 癌胚抗原相关细胞粘附分子19抗体 |
组织VEGFR1（FLT-1）激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | HEAT重复内含蛋白5A蛋白抗体 |
RPMI 1640完全培养液（无抗生素） | DHX58蛋白抗体 |
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NF KAPPA B P50蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 沉默调节样蛋白SirT7抗体 |
细胞培养基乳糖含量酶连续反应光谱法定量检测试剂盒 | 嗅觉受体5P2抗体 |
细胞FES激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 2号染色体开放阅读框16抗体 |
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CMV（CYTOMEGALOVIRUS）病毒标准曲线 | 细胞角蛋白8重组兔单克隆抗体 |
肌球蛋白重链7抗体 | RNA（鸟嘌呤9）甲基转移酶结构域蛋白3抗体 |
关键字： 鲍鱼立克次氏体病;检测试剂盒;荧光PCR法;
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