包纳米虫（Bona）检测试剂盒（PCR-荧光探针法）
试剂简介：
一、检测目标与流行病学意义
1.1 病原体特征
分类学：原生生物界（Protista），包纳米虫属（Bonamia），主要致病种包括：
Bonamia ostreae（欧洲牡蛎包纳米虫）
Bonamia exitiosa（亚太地区主导种）
产品名称 | 包纳米虫（Bona）检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 分类 | 荧光PCR |
货号 | XG-P1589 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
靶基因选择：
18S rRNA基因（属保守区，检测所有Bonamia spp.）
ITS-1区域（种特异性鉴别）
宿主范围：
主要感染牡蛎（Ostrea、Crassostrea属）
通过水体或活体运输传播，幼体死亡率>90%
1.2 技术优势
三重检测体系：
FAM：通用探针（18S rRNA）
HEX：B. exitiosa特异性探针
CY5：牡蛎EF1α内参基因
灵敏度：1个寄生虫/μL组织匀浆（比组织学检测敏感100倍）
二、试剂盒组成与样本处理
2.1 核心组分（48测试/盒）
组分 技术特性
核酸提取试剂 含蜗牛酶（Helicase）的软体动物组织裂解系统
PCR预混液 含抗多糖抑制因子（针对牡蛎糖原含量高的特性）
引物探针组 三通道设计（兼容Roche LightCycler 96等机型）
质控品 灭活B. exitiosa（阳性）、SPF牡蛎鳃组织（阴性）
2.2 样本采集规范
最佳样本：
濒死牡蛎：鳃组织或血淋巴（寄生虫载量最高）
无症状个体：消化腺穿刺取样
保存运输：
立即检测：4℃ RNAlater中保存≤72h
长期保存：液氮速冻后-80℃储存
三、标准化检测流程
3.1 操作步骤（全程约3小时）
核酸提取：
组织处理：50mg鳃组织+1mL裂解液（含β-巯基乙醇）
磁珠法纯化（30μL洗脱体积）
qPCR扩增：
反应体系（20μL）：
预混液10μL + 探针混合液2μL + 模板5μL + 无核酸酶水3μL
循环程序：
95℃ 5min → 45×[95℃ 15sec → 60℃ 45sec]（三通道采集）
3.2 结果判读标准
通道 Ct值范围 判定依据
FAM(18S rRNA) ≤35 包纳米虫属感染
HEX(ITS-1) ≤35 B. exitiosa特异性感染
CY5(内参) 20-25 样本质量合格
四、质量控制与技术创新
4.1 质控要点
抑制物监控：内参Ct值>25需稀释复测
交叉验证：
阳性样本建议吉姆萨染色（2-5μm圆形原生质体）
临界值样本需克隆测序（ITS-1区）
4.2 2025年升级
微流控现场版：
集成核酸提取与检测（1小时完成）
适配水产码头快速筛查
数字PCR定量：
科研版可检测0.1%的隐性感染率
五、应用与生物安全
5.1 典型场景
种苗检疫：
进口牡蛎幼体筛查（OIE必检项目）
育苗池定期监测
生态研究：
野生种群携带率调查
5.2 注意事项
灭活处理：阳性样本需121℃高压30分钟
引物更新：
每两年比对GenBank新序列（如2024年B. ostreae变异株）
公司正在出售的产品：
肝癌蛋白剪接变异体蛋白抗体 | 细菌乳糖酵解溴百里酚蓝（BTB）琼脂平板 |
组织相容性复合体蛋白1单克隆抗体 | 细胞CASPASE-3蛋白表达荧光定量检测试剂盒 |
脱氧胸苷酸激酶DTYMK抗体 | 冰冻切片肥大细胞（MAST CELL）天青A（Azure A） |
类表皮生长因子域7抗体 | β晶体体蛋白A2抗体 |
细胞碱性磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒 | H2-Q10蛋白多克隆抗体 |
食物总抗氧化能力（TAC）化学发光法定量检测试剂盒 | DIP2B蛋白抗体 |
糖果糖精（saccharin）含量比色法定量检测试剂盒 | 脑肠肽O酰基转移酶/Ghrelin O acyltransferase抗体 |
冰冻切片组织P27蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 成纤维细胞生长因子19抗体 |
蛋类羟丁酸待测样品处理试剂盒 | 嗅觉受体ai1抗体 |
组织FLT3激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 2号染色体开放阅读框50抗体 |
石蜡切片神经纤维银染（Bodian）试剂盒 | 包纳米虫（Bona）检测试剂盒（PCR-荧光探针法）活体细胞半胱-3（CASPASE-3）活性原位荧光染色检测试剂盒 |
线虫乙烷亚硝基脲（ENU）诱导突变试剂盒 | 细胞角蛋白9重组兔单克隆抗体 |
肌细胞增强因子2B抗体 | PE-Cy7标记小鼠CD62L单克隆抗体 |
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