本试剂盒可同步检测导致病毒性腹泻的8种核心病原体,覆盖90%以上的临床常见病例,适用于:
快速鉴别诊断:区分细菌性/病毒性腹泻,避免抗生素滥用
疫情暴发调查:食源性/水源性腹泻的病原溯源
院感防控:婴幼儿病房、养老院的聚集性腹泻监测
检测病原体清单
病原体 临床关联 高发人群
诺如病毒(NoV GⅠ/GⅡ) 食源性暴发主要病原 全年龄段
轮状病毒(RV-A) 婴幼儿重症腹泻首要病因 6月龄-2岁儿童
札如病毒(SaV) 社区获得性腹泻 儿童及老年人
星状病毒(AstV) 免疫功能低下者慢性腹泻 HIV患者/移植受者
肠道腺病毒(AdV-40/41) 全年散发腹泻 5岁以下儿童
人博卡病毒(HBoV) 腹泻伴呼吸道症状 婴幼儿
肠道病毒(EV) 夏秋季腹泻暴发 儿童
Aichi病毒(AiV) 旅行者腹泻常见病原 国际旅行者
二、技术原理与创新设计

1. 八重检测体系
采用微流控芯片技术,每个反应孔集成8组独立检测通道:
靶标 荧光通道 基因标记
NoV GⅠ FAM ORF1-ORF2连接区
NoV GⅡ HEX 衣壳蛋白VP1
RV-A CY5 VP6基因
SaV ROX RdRp基因
AstV Cy5.5 ORF1a
AdV-40/41 Texas Red 六邻体蛋白基因
HBoV+EV Quasar 670 NS1+VP1
AiV CAL Fluor 590 3CD蛋白酶区
2. 技术创新
超多重检测:单管反应实现8种病原体分型
内参系统:添加嗜热脂肪芽孢杆菌DNA监控提取与扩增
抗抑制设计:耐受粪便样本中胆汁盐/多糖等抑制剂
三、试剂盒组分与储存

1. 核心组分
冻干微球芯片:预装8组引物探针(每孔24反应)
粪便裂解缓冲液:含蛋白酶K和RNA稳定剂
阳性对照:8种病原体的RNA混合标准品
运输保存液:含RNase抑制剂的PBS
2. 储存条件
未开封:-80℃保存18个月,-20℃稳定6个月
开封后:芯片4℃保存≤1周(避光干燥)
运输:干冰(<-60℃)或专用冷链箱(2-8℃)
四、样本采集与处理

1. 标准化流程
粪便样本:取黄豆大小(≈100mg)加入1mL保存液
肛拭子:旋转擦拭直肠黏膜,浸入2mL PBS
呕吐物:离心取上清,过滤除渣
2. 关键注意事项
采样时机:腹泻发作24-48小时内病毒载量最高
防降解:液态样本需-80℃保存,避免反复冻融
灭活处理:95℃ 5分钟灭活其他病原体
五、检测操作流程

1. 全自动检测方案
核酸提取:配合全自动提取仪(通量1-96样本)
上样:5μL模板加入芯片反应孔
扩增:42℃ 30分钟(恒温扩增,无需热循环)
2. 结果判读
阳性阈值:荧光信号增长曲线S型且Ct≤35
交叉验证:双靶标病原体(如NoV GⅠ/GⅡ)需同时阳性