产品信息:

1. 细胞背景与基本特性
种属来源:人 (Homo sapiens)
组织来源:新生儿脐带华通氏胶 (Wharton's Jelly)
生长特性:贴壁生长
细胞形态:成纤维细胞样(长梭形、纺锤形)
产品名称 | 人脐带间充质干细胞-EGFP-LUC;MSC-EGFP-LUC-PURO | 英文名称 | MSC-EGFP-LUC-PURO:MSCEGFPLUCPURO |
货号 | AXB10706 | 生长特性 | 贴壁生长 |
用途 | 仅用于科研 实验 | 种属 | 人 |
标记基因:
EGFP:用于荧光显微镜观察和流式细胞术分选。
LUC:用于生物发光活体成像(需注射底物D-luciferin)。
Puro:嘌呤霉素抗性,用于维持筛选压力。
表面标志物:CD73、CD90、CD105 阳性(>95%);CD34、CD45、HLA-DR 阴性。
2. 核心参数速览

特征 描述
培养基 α-MEM 或 DMEM/F12 + 10% FBS
生长状态 贴壁生长 (梭形)
传代比例 1:3 ~ 1:5
消化时间 1-2 分钟 (胰酶消化)
冻存条件 90% FBS + 10% DMSO 或专用无血清冻存液
3. 详细培养操作指南

基础培养条件
温度:37℃
气体环境:95% 空气 + 5% CO
湿度:饱和湿度
推荐培养基配方
基础培养基:α-MEM(最低必需培养基)或 DMEM/F12。
血清:10% 胎牛血清 (FBS)(建议使用优质血清以促进生长)。
添加剂:1% 青霉素-链霉素 (P/S),1% 非必需氨基酸 (NEAA)。
筛选抗生素:嘌呤霉素 (Puromycin)。
注意:为了维持双标记的稳定表达,建议在培养基中添加嘌呤霉素(通常维持浓度为 0.5 - 1.0 μg/mL)。若用于动物体内移植,建议提前一周撤去抗生素。
传代操作 (当细胞密度达 80%-90% 时)
间充质干细胞贴壁较牢,需控制消化时间。
弃液:吸去旧的培养上清液。
润洗:加入适量不含钙、镁离子的 PBS 缓冲液,轻轻晃动润洗细胞层 1-2 次,弃去 PBS。
消化:加入 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液(T25 瓶加 1 mL),置于 37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟。
注意:需在显微镜下观察,待细胞间隙变大、细胞回缩变圆并脱落时,立即终止消化。不可消化过久,否则细胞难以贴壁。
终止:加入含血清的完全培养基终止消化。
离心与分装:将细胞悬液转移至离心管,300g (约 1000 rpm) 离心 5 分钟。弃上清,重悬后按 1:3 至 1:5 的比例分装到新瓶中。
冻存与复苏
冻存液:推荐使用 90% FBS + 10% DMSO,或专用的无血清细胞冻存液。
复苏:37℃ 水浴快速摇晃解冻,立即转移至含完全培养基的离心管中混匀,离心去除上清(去除 DMSO),重悬后接种。
4. 注意事项与常见问题

运输中的脱落(常见问题):
贴壁细胞在运输途中可能因震动导致脱落。收到细胞后,如果发现瓶底无细胞或细胞极少,请务必离心运输培养基,将管底沉淀的细胞团块重悬接种,不要直接丢弃。
接触抑制:
间充质干细胞对密度敏感,不可让细胞完全融合(100%)。一旦细胞长满,应立即传代。过度融合会导致细胞分化、状态变差或难以消化。
荧光观察:
EGFP:在荧光显微镜的 GFP 通道下观察,细胞核或胞浆应呈现绿色荧光(取决于载体构建)。
LUC:需加入底物(D-luciferin)后通过化学发光仪检测。
筛选压力:
如果在培养过程中去除了嘌呤霉素,可能会导致荧光信号逐渐减弱。建议在实验对照组中保持抗生素筛选。
总结:MSC-EGFP-LUC-Puro 是一种贴壁生长的双标记间充质干细胞系。它的培养关键在于回收运输后脱落的细胞、严格控制传代密度以及添加嘌呤霉素(PURO)以维持荧光素酶和绿色荧光蛋白表达。该细胞系是干细胞移植示踪和机制研究的有力工具。
公司正在出售的产品:
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GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit 小鼠抗核膜糖蛋白210抗体Multi-class antibodies规格: 48T | CD133 造血干细胞抗原(多肽抗原) 0.5mg |
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rHPV 英文名称: 重组人瘤病毒抗体 0.2ml | (EGFR)ELISA Kit 大鼠表皮生长因子受体 |
不同类型细胞的特异性(生物特性差异)

不同类型细胞的特异性(生物特性差异)
形态多样性:细胞形态因功能而异,如成纤维细胞呈梭形或多角形,神经细胞有突起,上皮细胞呈多边形紧密排列;细菌细胞多为球形、杆状或螺旋形。
功能特异性:动物细胞依赖线粒体供能,植物细胞具叶绿体进行光合作用;原核细胞(如细菌)无细胞核,真核细胞(如动植物细胞)有核膜包裹的核;某些细胞如酵母细胞可进行出芽生殖,哺乳动物细胞则通过有丝分裂增殖。
生长特性:贴壁细胞需附着表面生长(如成纤维细胞),悬浮细胞可在培养液中自由生长(如血液细胞);不同细胞分裂速度各异,如肿瘤细胞增殖较快,正常体细胞分裂较慢。
关键字: MSC-EGFP-LUC-PURO;人脐带间充质干细胞-EGFP-LUC;贴壁细胞;
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