豚鼠心肌细胞;GPH4
产品信息:

来源与标记
源自豚鼠心肌组织,通过基因工程改造稳定表达红色荧光蛋白(RFP)或荧光素酶(LUC),便于活细胞示踪与定量检测。
应用领域:
心肌细胞生理功能研究(如钙瞬变、收缩机制)
药物心脏毒性筛选(如阿霉素诱导的心肌损伤)
心肌缺血再灌注模型。
产品名称 | 豚鼠心肌细胞;GPH4 | 英文名称 | GPH4:GPH4 |
货号 | AXB10485 | 生长特性 | 贴壁生长 |
形态与生长
形态:心肌细胞特异性形态,呈短柱状或分支状。
生长特性:部分贴壁(依赖培养瓶表面处理),部分悬浮生长。
倍增时间:约48-72小时(37℃条件下)。
二、培养操作指南

培养体系与条件
基础培养基 DMEM高糖培养基
添加成分 10%胎牛血清(FBS) + 1%青霉素-链霉素 + 0.1 mM β-巯基乙醇
培养环境 温度:37℃ ;
气相:空气95% + CO? 5%
传代比例 1:2至1:3(贴壁细胞需胰酶消化)
冻存条件 90%完全培养基 + 10% DMSO,液氮储存
操作步骤
复苏
37℃水浴快速解冻冻存管,加入5 mL完全培养基混匀,离心(1000 RPM,5分钟)后重悬接种至明胶包被的T25瓶。
关键点:次日换液去除死细胞,连续观察2-3天。
传代
贴壁细胞:PBS清洗后,加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化1-2分钟(显微镜下观察细胞变圆脱落),加完全培养基终止消化。
悬浮细胞:直接离心收集(1000 RPM,5分钟),重悬后分瓶。
注意事项:消化时间需严格控制(过度消化损伤细胞)。
冻存
汇合度80%时消化,离心后用冻存液重悬,程序降温(-1℃/min)至-80℃后转入液氮。
三、关键注意事项

贴壁不牢问题
运输后细胞脱落属正常现象,可离心收集(1000 RPM,5分钟)后重新接种。
培养瓶需明胶包被(0.1%明胶,37℃孵育1小时)增强贴壁。
荧光标记维护
RFP标记细胞需避光培养,定期检测荧光强度(每10代一次)。
LUC标记细胞需添加嘌呤霉素维持筛选压力。
污染防控
定期检测支原体(推荐PCR法),避免真菌污染(培养基中可添加两性霉素B)。
四、常见问题与解决方案

问题 原因 解决方案
细胞活性低 消化过度或冻存复苏损伤 缩短胰酶作用时间,优化冻存程序
荧光信号减弱 传代次数过多或抗生素失效 每10代用嘌呤霉素巩固筛选
生长缓慢 血清批次差异或培养基pH异常 更换认证FBS,检测培养基pH(7.2-7.4)
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细胞具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字: GPH4;豚鼠心肌细胞;贴壁细胞;
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