NCI-N87+LUC人胃癌细胞荧光素酶标记
商品属性
产品名称 | NCI-N87+LUC人胃癌细胞荧光素酶标记 | 英文名称 | NCI-N87+LUC |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X900 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
种属:人
别称:NCI-N87+LUC
组织来源:胃管腺癌转移灶(肝脏)
疾病背景:胃管腺癌
标记方法:通过慢病毒转染稳定表达荧光素酶,需定期用嘌呤霉素维持荧光强度(建议传代8代后筛选)。
培养条件
培养基:RPMI1640 + 10%胎牛血清 + 1%双抗;或专用培养基。
传代比例:1:2至1:3,消化时间5-10分钟。
培养环境:37℃、5% CO₂,湿度70%-80%,倍增时间约48-80小时。
冻存条件:90% FBS + 10% DMSO,或非程序冻存液。
细胞特性
形态:上皮细胞样,贴壁生长。
受体表达:蕈毒碱胆碱受体、癌胚抗原(CEA)、TAG 72;不表达N-myc、L-myc、胃泌激素受体等。
致瘤性:可在裸鼠中成瘤。
STR鉴定:提供完整STR分型数据(如Amelogenin X/Y,CSF1PO 8/12等)。
运输与保存
冻存细胞:干冰运输(-80℃保存或直接复苏),发现干冰挥发或污染需立即联系供应商。
复苏活细胞:常温运输(T25瓶),收到后静置培养箱2-4小时再处理。
接收后操作
消毒处理:75%酒精擦拭瓶壁,显微镜观察细胞状态并拍照留存(10×,20×各2-3张)。
贴壁细胞处理:
静置2-3小时后观察贴壁情况(60%以下密度补6-8mL新培养基;70%-80%以上需传代)。
首次传代推荐比例:1:2(使用新配制培养基)。
复苏与传代
复苏步骤:
37℃水浴快速解冻细胞悬液,离心(1000rpm/5min)弃上清。
重悬于4-6mL完全培养基,培养过夜后换液。
传代步骤:
PBS洗涤细胞,加入0.25%胰蛋白酶消化1-2分钟(37℃)。
轻敲培养瓶使细胞脱落,加含血清培养基终止消化。
离心(1000rpm/8-10min)后重悬接种。
冻存要求
冻存液配方:90%无血清冻存液 + 10% DMSO。
注意事项
荧光维持:长期培养需嘌呤霉素筛选,避免荧光衰减。
专用培养基:若使用优化培养基,可直接培养无需调整。
用途限制:仅限科研,不可用于临床治疗。
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关键字: NCI-N87+LUC;人胃癌细胞荧光素酶标记;
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