NPC/HK-1人鼻咽癌细胞

NPC/HK-1人鼻咽癌细胞

商品属性

生长特性：贴壁生长，上皮样形态

来源背景：从无胸腺裸鼠异种移植物（xeno-666）建立，具有稳定的体外培养特性。

培养条件：

培养基：RPMI-1640 + 10%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素/链霉素（P/S）。

气相环境：5% CO₂、95%空气，37℃恒温培养。

冻存条件：90% FBS + 10% DMSO，液氮长期保存。

细胞复苏操作指南

预热培养基：将完全培养基置于37℃水浴中预热。

快速解冻：

从液氮中取出冻存管，立即放入37℃水浴，轻柔晃动至完全解冻（1-2分钟内）。

注意冻存管口避免接触水，防止污染。

离心洗涤：

将细胞悬液转移至含8 mL预热培养基的离心管中，800 rpm离心5分钟，弃上清。

用新鲜培养基重悬细胞，吹打均匀后接种至T25培养瓶。

培养观察：

24小时后更换培养基以去除死细胞，后续每2-3天换液，待细胞汇合度达80%-90%时传代。

细胞传代步骤

消化处理：

弃去旧培养基，用PBS轻柔润洗1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液（T25瓶1-2 mL），37℃消化1-3分钟，显微镜下观察至细胞变圆脱落。

终止消化：加入3-4 mL完全培养基终止反应，吹打均匀后离心（1000 rpm，5分钟）。

分瓶培养：按1:2比例分装至新培养瓶，补充培养基至6-8 mL，继续培养。

细胞冻存流程

收集细胞：

消化并离心细胞，PBS洗涤后计数，调整密度至5×10⁶~1×10⁷ cells/mL。

冻存液配制：使用无血清冻存液（或90% FBS + 10% DMSO），每支冻存管分装1 mL细胞悬液。

程序降温：

4℃放置30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 转移至液氮长期保存。

质量控制

STR鉴定：提供STR图谱报告，确保细胞株身份唯一性。

污染检测：定期进行支原体、细菌、真菌检测。

注意事项

消化时间需根据细胞状态调整，避免过度消化损伤细胞。

冻存细胞复苏后建议传代2-3次再用于实验，确保稳定性。

长期培养需定期更换血清批次，避免培养条件波动。
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