羟甲基戊二酰辅酶A合成酶(HMGCS)测定试剂盒/微量法/96样
测定意义:
羟甲基戊二酰辅酶 A 合成酶是甲羟戊酸代谢途径中的关键酶,催化乙酰 CoA 与乙酰乙酰 CoA 生成羟甲基戊二酰 CoA。
测定原理:
HMGCS 催化乙酰 CoA 与乙酰乙酰 CoA 生成羟甲基戊二酰 CoA ,同时产生CoASH ,使 DTNB 转化为黄色的TNB ,在 412nm 下有特征吸光值。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 412nm,蒸馏水调零。
2、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 25μL 试剂一、25μL 试剂二和 50μL 试剂三,混匀,加入 100μL 样本上清,迅速混匀后记录 412nm 下初始吸光值 A1 和 4min 后的吸光值 A2 。计算 ΔA =A2-A1。
注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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