丙酮酸脱氢酶(PDH)测定试剂盒/分光光度法/48样

丙酮酸脱氢酶(PDH)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

PDH（EC 1.2.4.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。

测定原理：

PDH 催化丙酮酸脱氢，同时还原 2,6-二氯酚靛酚（2,6-DCPIP），从而导致 600nm 光吸收的减少。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 605nm 处，蒸馏水调零。

2、工作液于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）中孵育 5min。

3、在 1mL 玻璃比色皿中加入 50μL 样本和 900μL 工作液，混匀，立即记录 605nm 处初始吸光值 A1 和 1min后的吸光值 A2，计算ΔA=A1-A2。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。