葡萄糖6磷酸酶(G6P)测定试剂盒/分光光度法/48样

葡萄糖6磷酸酶(G6P)测定试剂盒/分光光度法/48样

测定意义：

葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose 6 phosphatase ，G6Pase ，EC 3.1.3.9）广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。

测定原理：

G6P 催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖，变旋酶和葡萄糖脱氢酶进一步依次催化 NAD+还原生成 NADH ，在340nm 下测定 NADH 生成速率，即可反映 G6P 活性。

自备仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。

2 、 工作液的配制：临用前将试剂二、试剂三和试剂四转移到试剂一中混合溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

3 、 将工作液置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 5 分钟。

4 、 在 1mL 石英比色皿中加入 50μL 样本和 950 μL 工作液，立即混匀，记录 340nm 处初始吸光值 A1 和2min 后的吸光值 A2 ，计算 ΔA=A2-A1。

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。