磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)测定试剂盒/微量法/96样
测定意义：
PEPCK（EC4.1.1.32）广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中，催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸，是调节糖异生途径的关键酶。
测定原理：
PEPCK 催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和 CO2 ，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化 NADH 氧化生成 NAD+ ，在 340nm 下测定 NADH 下降速率，即可反映 PEPCK 活性。
自备仪器和用品：
分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。
2、工作液的配制：临用前将试剂二和试剂三转移到试剂一中混合溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
3 、试剂四的配制：临用前加入 1mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
4、将工作液和试剂四置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 5 分钟。
5、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、10μL 试剂四和 180μL 工作液，立即混匀，记录 340nm处初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2 ，计算 ΔA=A1-A2。
注 意：
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
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