棉籽糖含量测定试剂盒/48 样
测定意义:
棉籽糖是除蔗糖外植物界中分布最广的低聚糖,广泛存在于棉籽、甜菜糖蜜、桉树树液、小麦胚芽和其他谷物和豆类中。近年来,研究发现棉籽糖不仅是一种优良的双歧杆菌增殖因子,还具有低能量、能抑制肠内腐败产物、改善排便功能、防止便秘及增强机体免疫力、抵抗肿瘤等多种生理功能,是一种具有独特保健功能的活性物质。
测定原理:
c棉籽糖可通过示差折光检测器进行检测,可以利用高效液相色谱法测定其含量。
自备仪器和用品:
高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、氮吹仪、涡旋振荡器、针头式过滤器(有机系,50 个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各 1 个,0.45μm)、氨基柱(4.6 ×250 mm)、可调式移液器、样品瓶(50 个,2mL)、内衬管(50 个,放置在样品瓶内用于微量样品进样)、乙腈(色谱级,1800 mL)和超纯水。
棉籽糖含量测定操作步骤:
1. 开启电脑、检测器和泵,安装上色谱柱,打开软件,在方法组中设置进样量 25 μL,流速 1 .2 mL/min,柱温 35℃,保留时间 24 min,设置完毕保存方法组。
2. 用流动相过柱子,待基线稳定后开始加样。
3. 加入标准品 25 μL,在 30min 内可分离棉籽糖,棉籽糖的保留时间在 24 min 左右(柱子不同,保留时间有差异),计算不同浓度的棉籽糖标准品的峰面积。
4. 加入样品 25 μL,在相应保留时间处检测棉籽糖的峰面积。
注 意:
1 、若样品含水量较高,可适当提高样品量,并降低试剂一的用量。如样品为果肉,可以称取 0.5 g 样品,加入 0.7 mL 试剂一进行匀浆操作。
2 、为了避免使用过程中柱压过大,流速由小到大调节。
3 、使用完毕时,用 100%的异丙醇洗色谱柱 30min。
4、标准品的稀释倍数要根据样品中棉籽糖浓度确定,样品中棉籽糖的峰面积必须落在不同浓度的棉籽糖标准品的峰面积之内,该标准品稀释倍数只是一个参考。
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