辅酶ⅡNADP(H)含量测定试剂盒/微量法/48样

辅酶ⅡNADP(H)含量测定试剂盒/微量法/48样

测定意义：

辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NADP+和 NADPH 含量测定可以计算 NADP （NADPH + NADP+ )含量和 NADPH/NADP+ 比值，其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+ 比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一，而且在 PPP 途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。

测定原理：

分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NADP+和 NADPH。NADPH 通过 PMS 的递氢作用，使氧化型噻唑蓝（MTT）还原为甲瓒，570nm 下检测吸光值，从而测定 NADPH 含量。利用 6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原 NADP+为 NADPH ，从而检测 NADP+含量。

自备仪器和用品：

酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。

测定步骤：

加样表(在 1.5mL 棕色 EP 管中按下表依次加样）：

充分混匀，静置 5min 后，20000g ，25℃离心 5min，弃上清，沉淀中加入： 

注 意：

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。