乙酰辅酶A(Acetyl-CoA)测定试剂盒/分光光度法50管/48样
测定意义:
乙酰辅酶 A 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶 A 汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化,经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水,释放能量用于 ATP 合成。此外,乙酰辅酶 A 是合成脂肪酸,酮体,胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。
测定原理:
苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和 NAD 生成草酰乙酸和 NADH 。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶 A 和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶 A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应,乙酰辅酶 A 含量和 NADH 的生成速率成正比,340nm 下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶 A 含量的高低。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤:
1 、分光光度计预热 30min ,用蒸馏水于 340nm 处调零。
2 、取 920μL 工作液和 100μL 样本至 1mL 石英比色皿,混匀,立即记录 340nm 处 20s 的吸光值 A1 和 80s时的吸光值 A2 ,计算 ΔA=A2-A1。注 意:
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
联系商家时请提及chemicalbook,有助于交易顺利完成!