人肺动脉内皮细胞;HPAEC
商品属性
产品名称 | 人肺动脉内皮细胞;HPAEC | 英文名称 | HPAEC |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X11242 | 细胞生长 | 内皮细胞形态 |
种属来源:人
组织来源:肺动脉
生长特性:贴壁生长
形态特征:典型内皮细胞形态,呈铺路石样单层排列。
培养条件
培养基:
基础培养基:MCDB131(补充10 ng/mL EGF、1 μg/mL氢化可的松、10 mM谷氨酰胺)。
添加成分:10%胎牛血清(FBS)、1%青霉素-链霉素(P/S)。
培养环境:
温度:37℃
气相:95%空气 + 5% CO₂
湿度:70%~80%
细胞处理流程
细胞复苏
快速解冻:将冻存管置于37℃水浴中摇晃至完全融化(约1~2分钟)。
离心洗涤:转移至含10 mL培养基的离心管,1000 rpm离心4分钟,弃上清后重悬于新鲜培养基。
接种培养:按1×10⁶ cells/T25培养瓶密度接种,37℃静置培养,24小时后更换培养基。
细胞传代
消化步骤:
弃旧培养基,PBS洗涤后加入0.25%胰蛋白酶-EDTA(覆盖细胞层)。
37℃消化1~2分钟,显微镜下观察细胞变圆后,加入含血清培养基终止消化。
离心重悬:1000 rpm离心4分钟,弃上清,重悬于新鲜培养基。
分瓶比例:按1:2至1:5比例传代,建议每3~4天传代一次。
细胞冻存
冻存液配方:90%完全培养基 + 10% DMSO(现配现用)。
冻存步骤:
消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管(1~2 mL/管)。
程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
注意事项
无菌操作:全程在超净工作台中进行,避免污染。
状态监测:定期观察细胞形态及密度,80%~90%汇合时需及时传代。
质量控制:建议通过STR鉴定确保细胞株真实性。
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