商品属性

产品名称 | U87MG人脑星形胶质母细胞瘤 | 英文名称 | U87MG |
规格 | 1×106 | 货号 | P-X1010 |
来源:由J. Ponten等从恶性神经胶质瘤中分离建立,裸鼠皮下接种可成瘤。
细胞形态:上皮样,贴壁生长(易聚团,建议使用多聚-L-赖氨酸包被培养器皿以改善贴壁性)。
应用领域:科研用途,如肿瘤机制研究、药物筛选及外泌体介导的恶性表型分析等。
培养条件

培养基:MEM(含NEAA)+10%胎牛血清(FBS)+1%青霉素-链霉素(P/S)。
培养环境:
温度:37℃
气相:95%空气,5% CO₂
传代建议:
传代比例:1:2至1:4
换液频率:每周2-3次
实验操作指南

1. 细胞复苏
快速解冻:将冻存管从液氮或-80℃冰箱取出,迅速放入 37℃ 水浴锅中,轻轻摇晃,使冻存液在 1-2 分钟内完全融化(注意不要让水没过管口)。
转移:用 75% 酒精擦拭管口,将细胞悬液转移至含有 5-10 mL 预热完全培养基的离心管中(稀释 DMSO)。
离心:1000 rpm (约 150-200g) 离心 3-5 分钟。
重悬:弃去上清液,加入新鲜完全培养基重悬细胞,接种于 T25 培养瓶中。
培养:放入 37℃、5% CO₂ 培养箱中培养。次日更换培养基,以去除死细胞和残留的 DMSO。
2. 细胞传代 (当细胞融合度达 80%-90% 时)
吸液:吸去旧的培养基。
洗涤:加入适量 PBS 缓冲液轻轻润洗细胞 1 次(去除残留血清,利于胰酶发挥作用)。
消化:加入 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA) 约 1-2 mL (以覆盖瓶底为宜),放入 37℃ 培养箱消化 1-2 分钟。
观察:显微镜下观察,待细胞变圆、间隙变大或开始脱落时,立即进行下一步。
终止:加入含血清的完全培养基终止消化(血清能抑制胰酶活性)。
吹打:轻轻吹打细胞层,使细胞完全脱落并吹散成单细胞悬液。
离心:1000 rpm 离心 3-5 分钟。
分瓶:弃上清,加入新鲜培养基重悬,按 1:2 或 1:3 的比例接种到新的培养
注意事项:
血清质量直接影响细胞状态,建议选用优质FBS。
培养中若出现污染或异常形态,需终止使用并联系。
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关键字: U87MG;人脑星形胶质母细胞瘤;
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