本试剂盒用于已完成葡萄糖移除预处理的生物样品中 1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)的定量检测。本产品采用全干粉技术(检测主剂与标准品均为干粉),提供极佳的储存稳定性和运输安全性。
【检验原理】
复溶: 将干粉试剂溶解后,形成反应体系。
特异性氧化: 吡喃糖氧化酶(PROD)特异性氧化样本中的 1,5-AG,生成过氧化氢。
显色:在辣根过氧化物酶(HRP)催化下,生成物与色原(TOOS/4-AAP)结合产生红色信号,在 550 nm 处测定吸光度。
【储存条件及有效期】
未开封状态: 所有组分在 2-8℃ 避光保存,有效期 18 - 24 个月。
复溶后稳定性:
检测工作液 (F1+F2): 2-8℃ 避光可保存 7 天。
标准品溶液 (瓶 S): 复溶后若未用完,建议分装后置于 -20℃ 冷冻保存,可稳定 6 个月。避免反复冻融。
预处理阶段 (葡萄糖移除):
在 96 孔板中,分别加入 20 µL 待测样本和 20 µL 不同浓度的标准品 (Std 1-6)。
向所有孔加入 80 µL 葡萄糖移除工作液(配套试剂盒提供)。
37℃ 孵育 2-3 小时。
检测阶段 (显色):
从上述孔中各吸取 50 µL 反应液至新的板孔中。
加入 50 µL 本试剂盒的 检测工作液 (F1+F2)。
37℃ 避光孵育 15 分钟。
在 550 nm 处读取吸光度。
【结果计算】
以标准品浓度 (0 - 10 mM) 为横坐标,OD 值为纵坐标绘制标准曲线。
根据样本 OD 值查出浓度。
结果即为样本原始浓度(无需乘以稀释倍数,因标准品与样本经历了完全相同的处理流程)。
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