M14人黑色素瘤细胞
产品信息:

M14 细胞系基本参数
种属/来源 人源 (Human)
组织来源 皮肤 (黑色素瘤)
细胞形态 上皮细胞样 (Epithelial-like)
生长特性 贴壁生长 (Adherent)
培养基 DMEM (高糖)
生物安全等级 BSL-1
�� 培养条件与参数

M14 细胞的培养条件相对标准,通常使用 DMEM 培养基。
1. 培养基配方
基础培养基:DMEM (高糖)。
添加成分:
10% 胎牛血清 (FBS)
1% 青霉素-链霉素双抗 (P/S)
2. 培养环境
温度:37℃
气体环境:5% CO₂ + 95% 空气
湿度:70% - 80%
�� 细胞培养操作步骤

1. 收货与适应 (针对 T25 培养瓶)
消毒:收到细胞后,用 75% 酒精擦拭瓶身消毒。
静置:放入 37℃ 培养箱静置 2-4 小时,让细胞适应环境。
换液:显微镜下观察细胞状态。建议弃去运输用的培养基(灌液),用 PBS 洗涤一次,换用新鲜的完全培养基。
2. 细胞传代 (当细胞密度达 80%-90% 时)
M14 为贴壁细胞,推荐传代比例为 1:2 至 1:5。
弃液与清洗:吸去旧培养基,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
消化:加入适量 0.25% 胰蛋白酶 (Trypsin-EDTA),约 1 mL/瓶,置于 37℃ 培养箱消化 1-3 分钟。
镜检:在显微镜下观察,待细胞变圆、间隙变大并脱落时,立即终止消化。
终止与吹打:加入含血清的完全培养基终止消化,轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心与分瓶:1000 RPM 离心 5 分钟,弃上清,用新鲜培养基重悬沉淀,按 1:2 或 1:3 的比例分装到新的培养瓶中。
3. 细胞冻存
冻存液:推荐使用 90% FBS + 10% DMSO,或使用商业化的无血清冻存液。
密度:建议冻存密度为 1×10⁶ 个活细胞/mL。
步骤:消化收集细胞,离心洗涤,用冻存液重悬,分装入冻存管。使用程序降温盒或置于 -80℃ 冰箱过夜,随后转入液氮罐长期保存。
⚠️ 注意事项与常见问题

运输培养基处理:运输用的培养基(灌液)通常不可直接继续培养,需更换为新鲜配制的完全培养基。
贴壁较牢:部分资料显示 M14 细胞贴壁较牢,消化时可适当延长消化时间或增加吹打力度。
细胞形态:该细胞形态多呈上皮样。如果细胞密度过高,中间部分的细胞可能会因营养不足而死亡,因此建议及时传代。
科研用途:该细胞系仅用于科研实验,不可用于临床治疗。
公司正在出售的产品:
Anti-OPCML /FITC 荧光素标记样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgM/Cy5 Cy5标记的兔抗大鼠IgM 规格 0.1ml |
MLCK 英文名称: 肌球蛋白轻链激酶抗体 0.1ml | Anti-phospho-P53 (Thr18) 0酸化抑制基因P53抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
Rhesus antibody Rh RAG2 重组激活基因2蛋白抗体 规格 0.2ml | HLA G 英文名称: 人类白细胞抗原G抗体 0.1ml |
Beta-OHB(Human Beta-Hydroxybutyric Acid) ELISA Kit 人β羟 | LETMD1 英文名称: 原癌基因2抗体 0.2ml |
ACADM 英文名称: 酰基辅酶A脱氢酶中链抗体 0.2ml | ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit 人雄激素结合蛋白 |
Phospho-TrkA(Tyr674 + Tyr675) + TrkB(Tyr706 + Tyr707) 英文名称: 0酸化酪酸激酶A抗体 0.1ml | C1ORF151 英文名称: 1号染色体开放阅读框151抗体 0.1ml |
Rhesus antibody Rh PGF2 α 素F2a抗体 规格 0.2ml | AChRab-M1(Mouse acetylcholine receptor antibody) ELISA Kit 小鼠乙酰胆碱受体-M1抗体 |
Rhesus antibody Rh Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr716) 0酸化血小板源性生长因子受体B抗体 规格 0.1ml | 2,4-D/BSA 2,4-二氯苯氧乙酸偶联血清白蛋白Multi-class antibodies规格: 5mg |
ANT-1 英文名称: 腺嘌呤核苷酸转运蛋白1抗体 0.1ml | M14人黑色素瘤细胞Anti-caldesmon/smooth muscle /FITC 荧光素标记钙调结合蛋白/钙调素结合蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
CLDN1(Claudin 1) 紧密连接蛋白1抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | Anti-FLAG Tag(CT)/FITC 荧光素标记FLAG Tag标签抗体(C端)IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
细胞具体特点如下:

环境与营养:需无菌环境、精确的温度(36-37℃)和pH(7.2-7.4),动物细胞常需血清,植物细胞需激素。
生长方式:贴壁细胞需表面附着,悬浮细胞自由漂浮,半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度:贴壁细胞需胰酶消化传代,悬浮细胞直接分瓶;密度达80%-90%时需传代,避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性:对剪切应力、污染、温度变化敏感,需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限:便于活细胞观察与实验控制,但体外环境与体内存在差异,长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字: M14;人黑色素瘤细胞;贴壁细胞;
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