人纤维肉瘤细胞；HT-1080+CXCR4(h)-Puro
产品信息：
1. 细胞基本档案
参数维度 详细信息
中文名称 转染人源CXCR4基因的人纤维肉瘤细胞
种属/来源 人源（结缔组织；纤维肉瘤）
细胞形态 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
产品名称 | 人纤维肉瘤细胞；HT-1080+CXCR4(h)-Puro | 英文名称 | HT-1080+CXCR4h-Puro：HT1080CXCR4hPuro |
货号 | AXB10316 | 生长特性 | 贴壁生长 |
主要应用 肿瘤转移机制、CXCR4信号通路、药物靶点研究
筛选标记 Puromycin (嘌呤霉素)
背景基因 含有活化的 N-ras 癌基因
2. 详细培养条件
该细胞系在普通 HT-1080 培养条件基础上，需维持嘌呤霉素筛选压力以保持 CXCR4 基因的稳定表达。
基础培养基： 推荐使用 DMEM (高糖) 或 RPMI-1640。
血清添加： 添加 10% 胎牛血清 (FBS)。
双抗： 建议添加 1% 青霉素-链霉素 (P/S)。
筛选抗生素： 嘌呤霉素 (Puromycin)。通常维持浓度为 1-4 μg/mL（具体浓度请参考构建该细胞系的说明书或进行杀灭曲线测定）。
培养环境：
温度：37℃
气体：5% CO₂，95% 空气
湿度：饱和湿度
详细操作流程指南
细胞复苏
快速解冻： 将冻存管从液氮中取出，迅速放入 37℃ 水浴中摇晃，约 1 分钟内融化。
转移离心： 在生物安全柜内，将细胞悬液转移至含有 5-10mL 预热完全培养基的离心管中，混匀。
离心洗涤： 1000 RPM（约 150g）离心 5 分钟，弃去上清液。
接种培养： 用含嘌呤霉素的完全培养基重悬细胞，接种至 T25 培养瓶。
换液： 复苏后第二天建议换液，去除死细胞并补充新鲜抗生素。
细胞传代（贴壁细胞）
时机： 细胞密度达到 80%-90% 汇合度时。
消化液： 建议使用 0.25% 胰蛋白酶-EDTA 消化液。
操作步骤：
弃去旧培养基，用无钙镁 PBS 缓冲液润洗细胞 1 次。
加入 1-2 mL 消化液，置于 37℃ 培养箱中消化 1-2 分钟，镜下观察细胞变圆脱落。
加入含血清的完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀。
1000 RPM 离心 5 分钟，弃上清。
加入含嘌呤霉素的新鲜完全培养基重悬。
传代比例： 建议 1:2 至 1:5 传代。
换液频率： 每 2-3 天 更换一次培养液。
细胞冻存
冻存液配方： 推荐使用 90% FBS + 10% DMSO，或专用的无血清冻存液。
程序： 使用程序降温盒（或置于 -80℃ 冰箱过夜），随后转入液氮罐长期保存。
⚠️ 4. 关键注意事项
嘌呤霉素筛选： 为了维持 CXCR4 基因的稳定表达，培养基中必须持续添加 嘌呤霉素。若长时间不加压，转染的基因可能会丢失。
运输脱落问题： HT-1080 细胞系（包括其转染株）在运输过程中极易因震荡而脱落。请勿丢弃漂浮的细胞。处理方法是将培养瓶中的培养基收集到离心管中，离心（1000 RPM, 5min）收集沉淀，用新鲜培养基重悬后重新接种。
STR 鉴定： 建议在实验开始前进行 STR 鉴定，以确保细胞系的身份纯正，防止交叉污染。
用途限制： 该细胞系仅用于科学研究，不可用于诊断、治疗或人体临床实验。
公司正在出售的产品：
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细胞具体特点如下：
环境与营养：需无菌环境、精确的温度（36-37℃）和pH（7.2-7.4），动物细胞常需血清，植物细胞需激素。
生长方式：贴壁细胞需表面附着，悬浮细胞自由漂浮，半贴壁半悬浮兼具两者特性。
传代与密度：贴壁细胞需胰酶消化传代，悬浮细胞直接分瓶；密度达80%-90%时需传代，避免营养枯竭与代谢抑制。
敏感性：对剪切应力、污染、温度变化敏感，需定期更换培养液清除代谢物。
应用与局限：便于活细胞观察与实验控制，但体外环境与体内存在差异，长期传代可能导致遗传不稳定与去分化。
关键字： HT-1080+CXCR4(h)-Pur;人纤维肉瘤细胞；HT-1080+CXCR;贴壁细胞;
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