乙酰辅酶A羧化酶(ACC)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义：
ACC在生物体内催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酰辅酶A，是脂肪酸和许多次生代谢产物合成的关键酶。ACC的活性在一定程度上决定了脂肪酸的合成速度和含油量的高低。
测定原理：
ACC 能够催化乙酰辅酶 A、NaHCO3 和 ATP 生成丙二酰辅酶 A、ATP 和无机磷，通过钼酸铵定磷法测定无机磷的增加量来测定 ACC 活性。
需自备的仪器和用品：
分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。测定步骤：酶促反应
试剂名称(μL）
对照管
测定管
试剂一
450
试剂二
250
试剂三
200
样本
50
37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）准确反应 30min 后，90℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失），冷却后，10000g 25℃离心 5min，取上清
定磷
标准管
空白管
0.5μmol/mL 标准磷应用液
100
蒸馏水
上清液
定磷试剂
900
混匀，37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 30min，冷却至室温，在 660nm 处，蒸馏水调零，记录各管吸光值 A。标准管、空白管只要做一次即可，每个测定管需要设一个对照管。
若测定管吸光值大于 2，将样品用提取液稀释适当倍数后再进行测定，使吸光值小于 2，可提高检测灵敏度，计算公式中乘以相应稀释倍数。
上海酶联生物科技有限公司
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