脂肪酸合成酶(FAS)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
FAS 是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 而生成长链脂肪酸。FAS 普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。
测定原理:
FAS 催化乙酰 CoA、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成长链脂肪酸和 NADP+;NADPH 在 340nm 有吸收峰,而NADP+没有;通过测定 340nm 光吸收下降速率,计算 FAS 活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL 石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。FAS 测定操作:1. 分光光度计预热 30min,调节波长到 340 nm,蒸馏水调零。2. 试剂四置于 40℃水浴中预热 30 min。3. 测定管:在 1mL 石英比色皿中依次加入 100μL 上清液、20μL 试剂二、20μL 试剂三、820μL 试剂四和 40μL试剂五,迅速混匀后于 340nm 处测定吸光值,记录第 30s 和 90s 时吸光值,分别记录为 A1 和 A2。△A 测=A1-A2。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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