脂肪酸合成酶(FAS)测定试剂盒/微量法/96S
测定意义:
FAS 是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 而生成长链脂肪酸。FAS 普遍表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。
测定原理:
FAS 催化乙酰 CoA 、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成长链脂肪酸和 NADP+ ;NADPH 在 340nm 有吸收峰,而NADP+没有;通过测定 340nm 光吸收下降速率,计算 FAS 活性。
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、可调式移液枪和蒸馏水。粗酶液提取:1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1 :5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。12000g ,4℃离心40min,取上清置冰上待测。
2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000 :1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w ,超声 3 秒, 间隔 7 秒,总时间 3min);然后12000g ,4℃, 离心 40min,取上清置于冰上待测。
3. 血清等液体:直接测定。
注 意:
正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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