人卵巢癌细胞+GFP;A2780+GFP
商品属性
产品名称 | 人卵巢癌细胞+GFP;A2780+GFP | 英文名称 | GFPA2780+GFP |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X10759 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
产品概述
A2780+GFP是通过慢病毒转染技术在经典人卵巢癌细胞系A2780中稳定整合绿色荧光蛋白(GFP)基因的衍生株。GFP标记使细胞在荧光显微镜或活体成像系统中可实时追踪,适用于肿瘤侵袭转移研究、药物筛选及体内外微环境相互作用实验。
细胞特性
来源:人卵巢癌组织(上皮细胞样,贴壁生长)
标记基因:GFP(需定期检测荧光强度,传代次数增加可能导致信号减弱)
生物安全等级:1级
包装规格:
复苏发货:T25培养瓶(1瓶,含活细胞)
冻存发货:1 mL冻存管(2支,密度≥1×10⁶ cells/mL)
培养条件
培养基:RPMI-1640 + 10%胎牛血清(FBS) + 1%青霉素/链霉素
培养环境:37℃、5% CO₂、湿度>90%
换液频率:每周2-3次,密度达80-90%时传代
操作指南
复苏步骤
快速解冻:37℃水浴融化冻存管(1-2分钟),转移至含5 mL预温培养基的离心管。
离心去冻存液:1000 rpm离心5分钟,弃上清后重悬接种。
初始培养:复苏后24小时内避免扰动,促进贴壁。
传代流程
消化:0.25%胰酶-EDTA消化1-3分钟(显微镜下观察细胞回缩)。
终止:加入含血清培养基中和胰酶,吹打成单细胞悬液。
比例:按1:3至1:5分瓶,传代后均匀分布。
GFP稳定性维护
筛选压力:建议传代3代后冻存备份,后续使用嘌呤霉素(1-5 μg/mL梯度筛选)维持荧光强度。
监测:定期荧光显微镜观察,避免光漂白(减少曝光时间)。
冻存与保藏
冻存液配方:90% FBS + 10% DMSO(现配现用)。
步骤:对数生长期细胞消化后重悬于冻存液(1×10⁶ cells/mL),分装至冻存管,程序降温后转入液氮。
注意事项
严格无菌操作,超净台紫外线消毒30分钟。
避免反复冻融,冻存细胞建议分装多支备用。
实验前需通过STR鉴定确认细胞身份。
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