人卵巢癌细胞+GFP；A2780+GFP 新品

人卵巢癌细胞+GFP；A2780+GFP

商品属性

产品概述

A2780+GFP是通过慢病毒转染技术在经典人卵巢癌细胞系A2780中稳定整合绿色荧光蛋白（GFP）基因的衍生株。GFP标记使细胞在荧光显微镜或活体成像系统中可实时追踪，适用于肿瘤侵袭转移研究、药物筛选及体内外微环境相互作用实验。

细胞特性

来源：人卵巢癌组织（上皮细胞样，贴壁生长）

标记基因：GFP（需定期检测荧光强度，传代次数增加可能导致信号减弱）

生物安全等级：1级

包装规格：

复苏发货：T25培养瓶（1瓶，含活细胞）

冻存发货：1 mL冻存管（2支，密度≥1×10⁶ cells/mL）

培养条件

培养基：RPMI-1640 + 10%胎牛血清（FBS） + 1%青霉素/链霉素

培养环境：37℃、5% CO₂、湿度＞90%

换液频率：每周2-3次，密度达80-90%时传代

操作指南

复苏步骤

快速解冻：37℃水浴融化冻存管（1-2分钟），转移至含5 mL预温培养基的离心管。

离心去冻存液：1000 rpm离心5分钟，弃上清后重悬接种。

初始培养：复苏后24小时内避免扰动，促进贴壁。

传代流程

消化：0.25%胰酶-EDTA消化1-3分钟（显微镜下观察细胞回缩）。

终止：加入含血清培养基中和胰酶，吹打成单细胞悬液。

比例：按1:3至1:5分瓶，传代后均匀分布。

GFP稳定性维护

筛选压力：建议传代3代后冻存备份，后续使用嘌呤霉素（1-5 μg/mL梯度筛选）维持荧光强度。

监测：定期荧光显微镜观察，避免光漂白（减少曝光时间）。

冻存与保藏

冻存液配方：90% FBS + 10% DMSO（现配现用）。

步骤：对数生长期细胞消化后重悬于冻存液（1×10⁶ cells/mL），分装至冻存管，程序降温后转入液氮。

注意事项

严格无菌操作，超净台紫外线消毒30分钟。

避免反复冻融，冻存细胞建议分装多支备用。

实验前需通过STR鉴定确认细胞身份。
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