人卵巢癌腺癌细胞带绿色荧光；NIH:OVCAR-3/GFP (STR)

人卵巢癌腺癌细胞带绿色荧光；NIH:OVCAR-3/GFP (STR)

商品属性

产品概述

OVCAR-3/GFP 是通过慢病毒转染技术将绿色荧光蛋白（GFP）基因导入人卵巢腺癌细胞株 OVCAR-3 构建的荧光标记细胞系。该细胞保留了亲本细胞的特性（如上皮样形态、贴壁生长），同时可通过 GFP 荧光信号实现活细胞示踪，适用于肿瘤转移、药物筛选及体内外成像研究。

关键特性

来源与背景

亲本细胞 OVCAR-3 源自一名60岁白人女性卵巢腺癌组织，由 T.C. Hamilton 于1982年建系。

具有雌/雄激素受体表达，对阿霉素、顺铂等化疗药物表现出抗性，是研究卵巢癌耐药机制的常用模型。

荧光标记

通过慢病毒载体（如 Ubiquitin 启动子）稳定整合 GFP 基因，荧光信号可用于实时追踪细胞迁移、侵袭及体内成瘤过程。

培养条件

培养基：80% RPMI-1640 + 20% FBS + 0.01 mg/mL 胰岛素。

气相环境：95% 空气 + 5% CO₂，37℃恒温培养。

传代建议：贴壁生长，2-3天换液一次，传代比例 1:2 至 1:3。

培养与操作建议

收到细胞后（T25 培养瓶）：

消毒：用 75% 酒精擦拭瓶壁，置于超净台内。

静置：在培养箱中静置 2-4 小时，让细胞适应环境。

观察：显微镜下观察细胞密度。若密度在 60% 以下，建议直接换液继续培养；若达 70%-80% 以上，可进行传代。

传代（消化）：

该细胞为贴壁生长。当细胞密度达到 80%-90% 时进行传代。

步骤：弃去旧液 -> PBS 洗涤 -> 加入 0.25% 胰酶（Trypsin-EDTA）消化 1-3 分钟 -> 显微镜下观察至细胞变圆脱落 -> 加入完全培养基终止消化 -> 轻轻吹打混匀 -> 离心（1000 rpm, 3-5 分钟） -> 弃上清 -> 重悬并按 1:2 至 1:4 的比例分装到新培养瓶中。

冻存：

建议在细胞生长状态良好（对数生长期）时进行冻存。

使用无血清冻存液，程序降温盒控制降温速度，最终保存于液氮或 -80℃ 超低温冰箱中。

质量控制

需通过 STR 鉴定确保细胞株身份真实性。

建议定期检测 GFP 表达稳定性及细胞形态（不规则多边形或梭形，呈“铺路石样”排列）。

注意事项

运输与复苏：收到细胞后应立即更换新鲜培养基，避免使用运输用培养基长期培养。

实验应用：GFP 标记可能影响 Hoechst 33342 染料外排实验（如侧群细胞分析），需优化检测条件。
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