人弥漫性大B细胞淋巴瘤；TMD8

人弥漫性大B细胞淋巴瘤；TMD8

商品属性

来源：从一名61岁女性双重打击淋巴瘤（DHL）患者的外周血中建立，属于生发中心B细胞样（GCB）亚型，EBV阴性。

核心遗传特征：携带MYC基因易位（t(8;14)） 和BCL-2基因易位（t(14;18)），即“双重打击”（Double-Hit Lymphoma, DHL），具有高度侵袭性和不良预后特征。

形态与生长特性：

形态：淋巴母细胞样，圆形或椭圆形，单个或小簇悬浮生长

生长方式：悬浮生长（无贴壁能力，需离心收集）

倍增时间：约24-36小时（生长速度快，需高频传代）

培养条件

培养基 IMDM培养基 + 20%胎牛血清 + 1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境 37℃、5% CO₂、湿度70%-80%

传代比例 1:3-1:4传代（细胞密度达1×10⁶ cells/mL时操作，1000rpm离心5分钟）

冻存液 90% FBS + 10% DMSO（现配）或无血清冻存液

研究应用

TMD8因“双重打击”特性，主要用于：

双重打击淋巴瘤（DHL）的发病机制研究：MYC与BCL-2协同驱动的细胞增殖与凋亡抵抗

靶向药物联合治疗实验：如MYC抑制剂（如OMOMYC）与BCL-2抑制剂（如维奈克拉）的协同效应

耐药机制探索：模拟临床中DHL对R-CHOP方案的原发性耐药

关键操作注意事项

高频传代管理：因倍增时间短，需每日观察细胞密度，避免过度生长导致培养基酸化（pH值下降）。

IMDM培养基选择：相较于RPMI-1640，IMDM含更高浓度的氨基酸和维生素，更适合高代谢活性的DHL细胞。

细胞状态判断：健康TMD8细胞折光性强、大小均一；若出现大量碎片或聚团（直径>50μm），提示状态不佳，需及时更换培养基或复苏新冻存管。

代次：P4，冻存条件为无血清冻存液（FBS:DMSO=9:1）。

产品概述

专为人弥漫性大B细胞（DB细胞）设计，含1640基础培养基、特级胎牛血清及青霉素-链霉素，无需额外添加成分。

经优化测试，可维持细胞最佳生长状态。

培养与操作

复苏：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于完全培养基（含10% FBS的RPMI-1640），接种至T25瓶。

传代：

细胞覆盖80%时，用0.25% Y蛋白酶消化；

离心后按1:2分瓶，37℃、5% CO₂培养。

冻存：程序降温（-20℃→-80℃→液氮）或直接-80℃保存。

生长条件

培养基：90% RPMI-1640 + 10% FBS；

环境：5% CO₂、37℃恒温，悬浮生长。

注意事项

所有操作需在无菌条件下进行，避免污染。

细胞传代需密切观察形态，确保消化时间适中（回缩变圆即终止）。

长期保存建议使用液氮，短期可存于-80℃（程序降温盒优化存活率）。
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