人免疫球蛋白lambda骨髓瘤细胞带荧光素酶;MM.1S/LUC (STR)
商品属性
产品名称 | 人免疫球蛋白lambda骨髓瘤细胞带荧光素酶;MM.1S/LUC (STR) | 英文名称 | MM.1S/LUC |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 混合生长 |
货号 | P-X10644 | 细胞生长 | 淋巴母细胞 |
来源:由MM.1S细胞(源自42岁黑人女性多发性骨髓瘤患者外周血,分泌IgGλ轻链)通过慢病毒转染稳定整合萤火虫荧光素酶(Luciferase)基因构建,已通过STR分型鉴定(位点包括Amelogenin、D3S1358等)。
核心特征:
荧光素酶表达:可通过检测 luciferase 活性实时监测细胞增殖、迁移或体内成瘤情况
表面标志物:CD25⁺、CD38⁺、CD52⁺,表达糖皮质激素受体(GR),对地塞米松敏感
生长特性:混合生长(悬浮为主,少量疏松贴壁),形态呈淋巴母细胞样
培养条件
培养基 RPMI-1640 + 10%胎牛血清 + 1%双抗(青霉素/链霉素)
培养环境 37℃、5% CO₂、湿度70%-80%
传代方法 1:2传代(细胞密度达80%-90%时操作):
1. 悬浮细胞直接离心(1000rpm×5min)
2. 贴壁部分用0.25%胰酶消化1-2min,终止后合并离心
冻存液 90% FBS + 10% DMSO 或无血清冻存液(如货号C7001)
研究应用
MM.1S/LUC因携带荧光素酶报告基因,广泛用于:
体内成像研究:通过小动物活体成像系统(IVIS)追踪肿瘤生长、转移及药物疗效
药物筛选模型:评估靶向骨髓瘤药物(如蛋白酶体抑制剂、BCMA单抗)的体外/体内活性
信号通路研究:结合荧光素酶活性检测NF-κB、STAT3等通路的激活状态
关键操作注意事项
混合生长细胞处理:
悬浮细胞:直接收集培养液离心,避免遗漏;
贴壁细胞:用PBS轻洗后胰酶消化,确保两种状态细胞均被收集。
荧光素酶活性检测:
实验前24小时更换新鲜培养基,避免血清残留影响检测灵敏度;
底物(如D-荧光素)工作浓度建议50-150μg/mL,避光孵育10-15分钟后检测。
STR鉴定与传代限制:
建议每20代重新验证STR分型(已知STR图谱可参考供应商提供的DSMZ或ATCC比对数据);
长期培养需定期检测荧光素酶表达稳定性(可通过流式分选或有限稀释法纯化阳性克隆)。培养特性
生长方式:
混合生长(悬浮为主,部分轻微贴壁),需定期观察贴壁细胞融合度(不超过80%)。
贴壁细胞需用细胞刮处理后与悬浮细胞合并离心(1000rpm,5分钟),重悬分瓶。
培养液管理:
若培养液变黄,需补充新鲜培养液或分瓶。
建议传代比例1:2至1:3,每周换液2-3次。
复苏注意事项:
复苏后需约2周恢复稳定生长状态。
荧光素酶标记特性
该细胞系携带荧光素酶报告基因(Luc),适用于活体成像或体外荧光检测实验,需配套使用荧光素底物(如D-荧光素钾盐)进行信号检测。
质量控制
STR鉴定:提供STR图谱以确保细胞株遗传一致性。
注意事项
避免贴壁细胞过度融合,否则可能影响增殖活性。
长期培养需定期检测支原体污染。
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