人胚肺成纤维细胞；HELF (STR)

人胚肺成纤维细胞；HELF (STR)

商品属性

英文名称：Human Embryonic Lung Fibroblast Cell Line, HELF (STR authenticated)

来源：取自3-6个月龄人胚胎肺组织，经原代培养和传代纯化获得，已通过STR分型鉴定（位点包括Amelogenin、D3S1358、TH01等，与已知人胚肺成纤维细胞图谱匹配）。

核心特征：

形态与生长：长梭形成纤维细胞样，贴壁生长，呈典型“漩涡状”排列

增殖能力：有限传代寿命（约50-60代），无致瘤性（软琼脂克隆形成实验阴性）

功能特性：分泌胶原蛋白（Ⅰ型、Ⅲ型），可用于肺纤维化模型构建

培养条件

培养基 MEM培养基（含Earle's盐）+ 10%胎牛血清 + 1%双抗（青霉素/链霉素）

培养环境 37℃、5% CO₂、湿度70%-80%

传代方法 1:3-1:4传代（细胞融合度达80%-90%时操作）：

1. PBS润洗2次，0.25%胰酶-EDTA消化3-5分钟

2. 镜下观察胞质回缩、细胞间隙增大后加完全培养基终止

3. 1000rpm离心5分钟，重悬后按1:3比例接种新培养瓶

冻存液 90% FBS + 10% DMSO（现配）或55% MEM + 40% FBS + 5% DMSO

研究应用

HELF因接近正常肺组织生理特性，主要用于：

病毒学研究：呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒等感染机制分析，病毒滴度测定（如空斑实验）

肺纤维化模型：通过TGF-β1诱导上皮-间质转化（EMT），模拟肺纤维化病理过程

药物安全性评价：肺部毒性药物（如博来霉素）的体外细胞毒性检测

传代方法：

使用0.25%胰酶-EDTA溶液消化1-2分钟（贴壁细胞），轻拍培养瓶促进脱落，终止消化后离心重悬。

细胞复苏与冻存

复苏步骤：

快速从液氮中取出冻存管，立即置于37℃水浴中解冻（≤1分钟）。

转移至含预温培养基的无菌离心管，轻柔吹打混匀后离心（1000 rpm，5分钟）。

弃上清，用新鲜培养基重悬并接种至培养瓶。

冻存建议：使用含10% DMSO的冻存液，程序降温后保存于液氮。

运输与保存

运输条件：

活细胞：常温运输（装满培养基以维持营养），建议在24小时内处理。

冻存细胞：干冰运输，到货后立即转移至液氮或-80℃保存。

注意事项：长途运输需避免极端温度，夏季建议使用隔热包装。

质量控制

STR鉴定：提供STR分型报告，确保细胞株身份唯一性。

存活率：复苏后存活率≥90%（依操作规范而定）。

其他说明

血清浓度优化：建议使用10%-20%胎牛血清以提升细胞稳定性。

定期观察：需监测细胞形态、密度及培养基pH值，及时传代（推荐密度80%-90%时操作）。
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