人胚肾细胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro
商品属性
产品名称 | 人胚肾细胞+copGFP;HEK293-copGFP-puro | 英文名称 | HEK293-copGFP-puro |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X11288 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
细胞背景:人胚肾细胞(HEK293)通过慢病毒转导稳定表达 copGFP(一种优化的绿色荧光蛋白),并携带 嘌呤霉素(Puromycin)抗性基因。
应用领域:荧光标记示踪、药物筛选、基因表达研究、细胞互作实验等。
产品参数
| 参数 | 描述 |
| 细胞类型 | HEK293(人胚肾上皮细胞) |
| 荧光标记 | copGFP(激发波长: 488 nm,发射波长: 507 nm) |
| 抗性基因 | Puromycin(推荐筛选浓度:1-3 μg/mL,需用户验证) |
| 培养条件 | DMEM(高糖)+ 10% FBS + 1% Pen/Strep + 2 μg/mL Puromycin(维持培养) |
| 冻存液 | 90% FBS + 10% DMSO |
| 支原体检测 | 阴性 |
培养与处理指南
细胞复苏
快速解冻后转移至含完全培养基的离心管,离心(1000 rpm, 5 min),弃上清,重悬后接种于培养瓶。
注意:初始48小时建议添加额外Puromycin(2 μg/mL)以维持筛选压力。
传代与扩增
推荐传代比例:1:3至1:6(80%汇合时)。
传代步骤:PBS洗涤 → 0.25%胰酶消化 → 完全培养基终止消化。
荧光稳定性
长期培养时建议定期用Puromycin处理(每3-5代)以避免GFP表达丢失。
质量控制
荧光验证:>95% 细胞表达copGFP(流式检测或荧光显微镜观察)。
无菌检测:细菌、真菌、支原体阴性。
活力检测:复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色)。
注意事项
Puromycin敏感性:初次使用前需滴定最佳筛选浓度(建议1-3 μg/mL梯度测试)。
荧光衰减:避免长时间强光照射,分选后建议重新筛选。
存储条件:液氮长期保存;避免反复冻融。
规格:1×10⁶ cells/vial
运输:干冰或液氮运输
保存:≤-80°C(短期),液氮(长期)
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