人胚胎干细胞H9;h9(WAO9)
商品属性
产品名称 | 人胚胎干细胞H9;h9(WAO9) | 英文名称 | H9h9WAO9 |
规格 | 1×106 | 细胞形态 | 贴壁生长 |
货号 | P-X10770 | 细胞生长 | 上皮细胞样 |
产品简介
H9(WA09)人胚胎干细胞系由James Thomson博士于1998年建立,源自人类早期胚胎内细胞团(ICM),具有无限增殖、自我更新及多向分化潜能。该细胞系为国际通用标准株之一,适用于发育生物学、疾病模型构建及再生医学研究。
关键特性:
培养方式:贴壁生长,呈克隆状集落,无需饲养层细胞支持,需使用Matrigel基质胶包被培养器皿。
培养基:推荐使用hESC/iPSC完全培养基或mTeSR™1培养基,可选择性扩增未分化细胞。
冻存规格:1 mL冻存管,细胞密度≥1×10^6个/mL,经检测无支原体、细菌、酵母及真菌污染。
培养条件与方法
试剂准备
hESC/iPSC完全培养基配制(500 mL)
在4℃解冻hESC/iPSC Growth Supplements A/B(避免37℃解冻)。
按比例混合基础培养基与补充剂,4℃保存,封口膜密封后2周内使用。
建议初次培养时配制100 mL以减少浪费。
传代操作
消化步骤:
细胞融合达80%时,以1:4比例传代。
使用4 mg/mL胶原酶IV消化20分钟,加入ROCK抑制剂终止消化。
150 rpm离心15分钟后,用含ROCK抑制剂的培养基重悬,轻柔吹打形成小细胞团(避免单细胞悬液)。
接种密度:推荐0.4×10^4~2×10^4 cells/cm²。
日常维护
每日更换新鲜培养基,观察集落形态,及时去除分化区域。
质量控制
形态学:未分化细胞呈高核质比、紧密排列的克隆状集落。
标志物检测:需定期验证OCT4、NANOG等多能性标志物表达。
无菌检测:定期进行支原体及微生物污染筛查。
注意事项
培养基组分需分装冻存,冻融次数≤2次。
传代时避免过度消化导致单细胞化(影响存活率)。
分化实验需根据目标谱系调整诱导方案(如神经外胚层分化需特定生长因子组合)。
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