人皮肤基底细胞癌；TE354.T (STR)

人皮肤基底细胞癌；TE354.T (STR)

商品属性

关键背景信息

来源：人皮肤基底细胞癌组织

分子特征：

Hedgehog信号通路激活：GLI1/2高表达，PTCH1基因突变（基底细胞癌典型特征）

标志物：表达CK5/6（基底细胞标志物）、整合素α6β4，不表达黑色素细胞标志物MITF

STR鉴定：核心位点（如Amelogenin: X；D3S1358: 15/17；TH01: 6/9.3）与标准图谱匹配，可向供应商索取完整鉴定报告

生长特性

形态：上皮细胞样（多边形），贴壁生长，呈“铺路石状”排列

倍增时间：24-30小时（对数生长期）

成瘤性：裸鼠皮下接种1×10⁶细胞可成瘤，8-10天形成直径5mm肿瘤结节

培养条件与操作指南

培养基 基础配方：高糖DMEM（含L-谷氨酰胺）+ 10% FBS + 1%双抗（青霉素/链霉素）

特殊需求：若研究Hedgehog通路，建议添加0.1mM非必需氨基酸（NEAA）

培养环境 37℃、5% CO₂、湿度95%，推荐使用明胶包被培养瓶（0.2%明胶，37℃孵育30分钟）增强贴壁

传代流程 1. 细胞融合度达80%-90%时，弃上清，PBS润洗2次

2. 加入0.25%胰酶-EDTA（1mL/T25瓶），37℃消化1-2分钟（镜下观察70%细胞变圆）

3. 加完全培养基终止（培养基:胰酶=3:1），1000rpm离心5分钟

4. 按1:2-1:3比例接种，T25瓶加6mL培养基

冻存方案 冻存液：90% FBS + 10% DMSO（现配），冻存密度1×10⁶ cells/mL，程序降温（-80℃过夜后转入液氮）

保存与运输

冷冻保存方法：

方法一（梯度降温）：

4℃ 300分钟 → -20℃ 30分钟 → -80℃ 16~18小时 → 液氮长期储存。

方法二（程序降温）：

使用可编程降温仪（每分钟降1~3℃至-80℃以下），后转移至液氮。

注意：-20℃停留时间不超过1小时，避免冰晶损伤细胞。

运输条件：

干冰运输，根据细胞状态自主安排发货时间。

使用注意事项

污染控制：

主要污染风险包括操作不当、环境不洁或血清污染，需严格无菌操作。

用途限制：

仅科研使用，禁止用于生产或转让。
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