人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株；HCT15/Fu

商品属性

来源：通过HCT-15人细胞经5-氟尿嘧啶（5-FU）药物筛选构建的耐药株。

细胞特性

形态：上皮细胞样，贴壁生长。

规格：T25培养瓶或1mL冻存管包装，细胞数≥1×10^6。

用途：限科研使用（非临床或药用）。

质量控制

STR鉴定：经HCT15细胞系STR位点验证，确保遗传背景一致性。

耐药性验证：持续暴露于5-FU（10–16 μg/mL）维持耐药表型。

运输与保存

运输条件：

常温运输（T25瓶充液包装）或干冰运输（冻存管）。

保存方式：

短期：复苏后37℃恒温培养箱（5% CO₂）中培养。

长期：冻存于液氮（需使用90%胎牛血清+10% DMSO冻存液）。

细胞处理指南

复苏步骤：

37℃水浴快速解冻冻存管，离心（1000 rpm, 3–5 min）后重悬于无药培养基。

接种后静置培养24小时，待细胞贴壁率达80%再添加5-FU（初始浓度建议减半以适配状态）。

注意：避免冻存管温差爆炸风险，需佩戴防护装备。

传代培养：

汇合度80%~90%时，按1:2比例传代，使用含5-FU的完全培养基维持耐药性。

冻存建议：

使用新鲜配制的冻存液（不含药物），分装后梯度降温保存于液氮。

注意事项

药物配制：5-FU母液建议以20 mg/mL浓度配制（NaOH溶解），分装避光保存（4℃/1周，-20℃/1个月，-80℃/6个月）。

污染处理：收到细胞48小时内反馈污染问题需提供显微镜照片（100×、200×）及操作记录。

活性保障：台盼蓝染色法验证活力，7天内可申诉活性异常。

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