甲基柠檬酸合酶(MCS)测定试剂盒/分光光度法/24样
测定意义:
MCS 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,与柠檬酸合酶(CS)共同参与三羧酸循环的调节。
测定原理:
MCS 催化丙酰 CoA 和草酰乙酸产生甲基柠檬酰辅酶 A,进一步水解产生甲基柠檬酸;该反应促使无色的DTNB 转变成黄色的 TNB,在 412nm 处有特征吸光值。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水。加样表和测定步骤:样本测定
试剂名称(μL)
测定管
试剂四
780
试剂五
30
试剂六
样本
试剂七
将上述试剂按顺序加入 1 mL 玻璃比色皿中,加试剂七的同时开始计时,在 412nm 波长下记录 20 秒时的初始吸光度 A1 和反应 2min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A2-A1。
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
上海酶联生物科技有限公司
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