人淋巴母细胞瘤(EBV转化)；NCIBL2009

商品属性

英文名称：NCI-BL2009

物种来源：人

细胞形态：淋巴母细胞样

生长特性：悬浮生长

细胞来源与特性

该细胞系源自一名68岁女性肺腺癌患者的外周血B细胞，经EB病毒（EBV）转化建立，适用于科研用途（非临床）。

培养条件

培养基：RPMI 1640（不含Hepes）

血清添加：10%胎牛血清（FBS）

传代方法：

维持细胞密度在1×10⁶~3×10⁶ cells/mL之间；

每周换液2~3次；

传代比例建议1:2至1:3。

传代记录：当前传代次数为C3代。

冻存条件

冻存液配方：基础培养基 + 8% DMSO + 20% FBS；

冻存建议：液氮长期保存。

质量控制

支原体检测：培养法检测结果为阴性（-）；

细胞状态：提供发货时细胞状态照片，确保对数生长期（60%~70%汇合度）。

细胞处理流程

 复苏步骤

37℃水浴快速解冻冻存管（1min内）；

加4mL培养基混匀 → 1000 RPM离心5分钟 → 弃上清；

加1-2mL培养基重悬 → 转移至T25瓶/10cm皿（补足8mL培养基）；

37℃培养过夜 → 次日换液并检查密度。

传代步骤（贴壁细胞，密度80%-90%时）

PBS润洗1-2次（去除钙镁离子）；

加1mL 0.25%胰酶-EDTA，37℃消化1-2分钟（显微镜下观察变圆脱落）；

加少量培养基终止消化 → 吹打收集细胞 → 1000 RPM离心4分钟；

按比例1:2至1:5分装至新培养瓶（含8mL培养基）。

冻存步骤

消化收集细胞（同传代）；

重悬于冻存液（90%完全培养基 + 10% DMSO，现配）；

分装至冻存管 → 程序降温 → 液氮长期保存。

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