乳糖含量分光光度法/24样 新品

乳糖含量分光光度法/24样

产品简介：
乳糖在β-半乳糖苷酶作用下分解成半乳糖和葡萄糖 ，葡萄糖被特异性酶氧化产生与显色剂反应的（粉）红色产物 ，该产物在 510nm 处有最大吸收峰 ，通过校正游离的葡萄糖背景值进而得到乳糖含量。

试剂清单：

所需仪器和用品：

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、天平、移液器、研钵、离心机、蒸馏水。

注 意：
正式测定前务必取 3 - 5 个预期差异较大的样本做预测定

样品提取（按照步骤依次操作）：

组织样本：

1、0.1g 组织样本（水分充足的样本建议取 0.2g 左右），加 1mL 蒸馏水研磨，粗提液全部转

移到 EP 管中， 12000rpm 离 ，常温离心 10min ，上清液待测。

液体样品：

1、近似中性的澄清液体样本可直接检测；若为酸性样本则需先用 NaOH(2M)调 PH 值约 7.4，

然后室温静置 30min ，取澄清液体直接检测。

(可选取几个样本 ，进行不同倍数的稀释 ，选取适合本次样本的稀释倍数 D)

高蛋白含量组织样本：

1、提取液 A1 的制备：加入 2mL 蒸馏水充分溶解；

2、提取液 A2 的制备：加入 2mL 蒸馏水充分溶解；

3、称取约 0.1g 样本（水分充足的样本建议取 0.2g 左右），加 0.9mL 蒸馏水研磨，粗提液全

部转移到 EP 管中，加入 0.05mL 提取液 A1，混匀后加入 0.05mL 提取液 A2，混匀，用蒸馏水定容到 1mL ，室温静置 30min ，若有脂肪除去上层脂肪， 12000rpm 室温离心10min ，取澄清的液体检测。

细胞样本：
1、先收集细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细胞加入 1mL 生理盐水或磷酸缓冲

液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；12000rpm 4℃离心 10min ，取上清 ，置冰上待测。