组织活性氧(ROS)荧光法测定试剂试盒(绿色)/96样产品简介:在正常的生命过程中,活性氧是维护生命所必需,在体内处于一种不断产生、不断清除的动态平衡中,始终维持在一个正常的水平,可以说是机体的一种有效的防御系统。活性氧的生理功能为参与体内的电子转移、杀菌和物质代谢。
利用化学荧光指示剂即荧光探针:2’,7’-Dichlorofluorescin Diacetate ,(DCFH-DA)检测组织内的活性氧。DCFH 可以被各种活性氧所氧化,转变成一种可以产生荧光信号的物质即二氯荧光素(2’,7’-Dichlorofluorescein ,DCF) ,所得到的 DCF 荧光信号并不是被某种单一的活性氧氧化所产生,所以用这种荧光指示剂测定的活性氧,反映的是所有活性氧的总的氧化能力。这种荧光信号在激发波长 488nm和发射波长 525nm 处有最大波峰,其荧光强度和活性氧水平成正比。
试剂盒的组成和配制:
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 110mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体μL×1 支
-20℃保存
低温时易结晶,使用前可在 25℃水浴至全部融解后使用。
所需的仪器和用品:
荧光酶标仪、台式离心机、可调式移液器、黑色 96 孔板、研钵和冰。
活性氧(ROS)测定:建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验样本和试剂浪费!
1 、样本制备:① 组织样本:取约 0. 1g 组织,加入 1mL 提取液,进行冰浴匀浆。12000rpm ,4℃离心10min ,取上清待测。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1 :5~ 10 的比例进行提取
② 液体样品:澄清液体样本直接检测,若浑浊则 12000rpm,离心 10min 取上清液待测。2 、上机检测:
① 酶标仪预热 30min ,调节波长。
② 所有试剂解冻至室温(25℃) 。
上海酶联生物科技有限公司
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