产品特点
即开即用：用户仅需提供样品DNA模板，无需额外配制反应体系。
高特异性：引物针对小麦GAG56D基因高度保守区设计，避免与其他微生物DNA交叉反应。
内置对照：提供阳性对照，有效区分假阴性结果。
便捷电泳：PCR Mix含上样染料，反应后可直接电泳分析。
优化性能：预混液经严格优化，确保扩增效率与稳定性。
产品名称 | 小麦内标准GAG56D基因染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Wheat Internal Standard GAG56D Gene Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR2716 |
操作流程
1. 样品准备
DNA提取：按标准方法提取样品DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. PCR反应体系配制（以20μL为例）
| 成分 | 体积（μL） |
| 2× PCR Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| ddH₂O | 6 |
3. PCR扩增程序
| 步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95 | 5 min | 1 |
| 变性 | 95 | 30 sec | 35 |
| 退火 | 55-60* | 30 sec | |
| 延伸 | 72 | 30 sec | |
| 终延伸 | 72 | 5 min | 1 |
*注：退火温度需根据引物Tm值优化。
4. 结果分析
通过荧光定量PCR仪检测扩增曲线，或通过琼脂糖凝胶电泳（1.5%-2%）观察目的条带。
实验参数设置
基线设定：建议选择循环数6~15，起始点避开信号波动阶段，终止点早于最早扩增样本Ct值1~3个循环。
扩增程序：
预变性：95℃ 3分钟
循环阶段（40次）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
注意事项
实验分区：试剂配制、样品处理及扩增需在不同区域进行，避免污染。
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
适用范围：仅限科研，不适用于临床诊断或生产用途。
质量控制：建议每次实验同步运行阳性对照与无模板对照（NTC）。
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关键字： 小麦内标准GAG56D基因;染料法荧光定量;PCR试剂盒;