金钱白花蛇染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Bungarus multicinctus Real-Time PCR Kit (SYBR Green Dye Method)
规格
50T
货号
PR2659
检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对金钱白花蛇基因高度保守区域设计特异性引物。通过DNA聚合酶催化扩增，SYBR Green染料与双链DNA结合后释放荧光信号，仪器实时监测荧光强度，实现核酸的定性和定量分析。
试剂组成
金钱白花蛇扩增液：含特异性引物及PCR缓冲成分。
金钱白花蛇反应液：含DNA聚合酶、dNTPs及SYBR Green荧光染料。
阳性质控品：已知浓度的金钱白花蛇DNA片段（非活体样本）。
阴性质控品：无靶标核酸的缓冲液。
操作步骤
样本处理
提取待测样本DNA，建议使用商业核酸提取试剂盒。
阳性对照稀释（以10E2-10E7拷贝/μL为例）
标记离心管（7-2号），每管加入45μL稀释液。
7号管加入5μL初始阳性对照（1×10E8拷贝/μL），震荡混匀后依次梯度稀释至6号管（1×10E6拷贝/μL），冰上保存。
PCR反应体系配制
按比例混合扩增液、反应液及模板DNA，总反应体积20μL。
上机检测
设置扩增程序：预变性（95℃, 5min）→循环阶段（95℃ 15s, 60℃ 30s, 40次）→熔解曲线分析。
结果判读
定性：扩增曲线呈“S”形且Ct值≤35为阳性。
定量：通过标准曲线计算初始模板浓度。
注意事项
阳性对照稀释需在独立区域操作，避免污染。
使用带滤芯枪头，防止气溶胶污染。
熔解曲线分析可验证扩增特异性。
储存与运输
-20℃避光保存，避免反复冻融。
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