油菜源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 油菜源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Canola-Derived Component SYBR qPCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR2678 |
试剂盒组分
PCR反应预混液:含SYBR Green荧光染料、dNTPs、Mg²⁺、缓冲液等。
引物混合液:针对油菜源性成分(如PEP基因或其他特异性序列)设计的特异性引物。
阳性质控品:950μL×1管(无传染性DNA片段,浓度1×10⁸拷贝/μL)。
阴性质控品:50μL×1管(无模板对照,用于排除污染)。
说明书:1份(含操作流程、数据分析方法等)。
注意:不同批号组分不可混用。
适用仪器与耗材
仪器:支持SYBR Green通道的荧光定量PCR仪。
耗材:无核酸酶的0.2mL PCR管、滤芯吸头(10/200/1000μL)、离心机等。
样品要求
样本类型:食品、植物组织、加工品等需检测油菜源性成分的样本。
样本处理:
提取DNA时避免交叉污染,建议使用商品化核酸提取试剂盒。
短期保存于-20℃,长期保存需-70℃(不超过6个月)。
运输:2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
操作方法
标准曲线制备(定量检测需选做):
将阳性质控品梯度稀释(10²~10⁷拷贝/μL),每个浓度设3复孔。
PCR反应体系(20μL):
预混液10μL + 引物2μL + 模板DNA 2μL + ddH₂O补至20μL。
扩增程序:
预变性:95℃ 5分钟;
循环阶段:95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(40循环,采集荧光信号);
熔解曲线分析:60~95℃(验证扩增特异性)。
结果判读
定性检测:Ct值≤35且熔解曲线为单一峰,判为阳性。
定量检测:根据标准曲线计算模板浓度(线性范围10²~10⁷拷贝/μL)。
注意事项
实验需在独立洁净区域进行,避免气溶胶污染。
阳性质控品仅用于验证实验有效性,不可直接作为样本检测。
若需定制其他基因(如抗药性基因、转基因元件),可联系提供特异性引物设计服务。
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