受体染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 受体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Receptor Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR2681 |
产品概述
本试剂盒基于SYBR Green I染料法，适用于一步法实时荧光定量PCR检测，整合反转录与qPCR反应于同一体系，操作便捷且灵敏度高。适用于RNA/DNA模板的定量分析，广泛应用于基因表达研究、病原体检测及转基因成分鉴定等领域。
产品组分
2×预混缓冲液：含优化反应缓冲体系、dNTPs及SYBR Green I染料。
酶混合液：耐热反转录酶（如Hifair® V）和热启动Taq DNA聚合酶（如UNICON® HotStart）。
无核酸酶水：用于稀释模板或调整反应体积。
阳性对照（部分型号提供）：无传染性DNA片段，用于标准曲线构建。
保存条件
长期保存：-20℃避光保存，有效期24个月，避免反复冻融。
短期使用：4℃可稳定保存3个月。
性能参数
灵敏度：RNA检测下限达0.1 pg（高表达靶标），DNA检测可至单拷贝。
重复性：复孔间变异系数（CV）<5%。
线性范围：覆盖5个数量级（如10²–10⁷拷贝/μL）。
仪器兼容性：支持No Rox/Low Rox/High Rox平台（如ABI、Bio-Rad、Roche等机型）。
操作步骤
标准曲线制备（定量检测需选做）：
将阳性对照梯度稀释（如10²–10⁷拷贝/μL），独立操作避免污染。
反应体系配制（20 μL示例）：
2×预混液 10 μL
引物各0.4 μL（终浓度0.2 μM）
模板RNA/DNA 2 μL
无核酸酶水补至20 μL。
程序设置：
反转录：50℃ 15分钟（RNA模板需选）→ 预变性：95℃ 5分钟 → 扩增：95℃ 10秒，60℃ 30秒（40循环）→ 熔解曲线分析。
注意事项
应用限制：仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
污染控制：建议在超净台操作，使用带滤芯枪头。
熔解曲线：需验证扩增特异性，单峰表明无非特异性产物。
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