受体染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 受体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Receptor Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR2681 |
产品概述
本试剂盒基于SYBR Green I染料法,适用于一步法实时荧光定量PCR检测,整合反转录与qPCR反应于同一体系,操作便捷且灵敏度高。适用于RNA/DNA模板的定量分析,广泛应用于基因表达研究、病原体检测及转基因成分鉴定等领域。
产品组分
2×预混缓冲液:含优化反应缓冲体系、dNTPs及SYBR Green I染料。
酶混合液:耐热反转录酶(如Hifair® V)和热启动Taq DNA聚合酶(如UNICON® HotStart)。
无核酸酶水:用于稀释模板或调整反应体积。
阳性对照(部分型号提供):无传染性DNA片段,用于标准曲线构建。
保存条件
长期保存:-20℃避光保存,有效期24个月,避免反复冻融。
短期使用:4℃可稳定保存3个月。
性能参数
灵敏度:RNA检测下限达0.1 pg(高表达靶标),DNA检测可至单拷贝。
重复性:复孔间变异系数(CV)<5%。
线性范围:覆盖5个数量级(如10²–10⁷拷贝/μL)。
仪器兼容性:支持No Rox/Low Rox/High Rox平台(如ABI、Bio-Rad、Roche等机型)。
操作步骤
标准曲线制备(定量检测需选做):
将阳性对照梯度稀释(如10²–10⁷拷贝/μL),独立操作避免污染。
反应体系配制(20 μL示例):
2×预混液 10 μL
引物各0.4 μL(终浓度0.2 μM)
模板RNA/DNA 2 μL
无核酸酶水补至20 μL。
程序设置:
反转录:50℃ 15分钟(RNA模板需选)→ 预变性:95℃ 5分钟 → 扩增:95℃ 10秒,60℃ 30秒(40循环)→ 熔解曲线分析。
注意事项
应用限制:仅限科研使用,不可用于临床诊断或治疗。
污染控制:建议在超净台操作,使用带滤芯枪头。
熔解曲线:需验证扩增特异性,单峰表明无非特异性产物。
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