预期用途
本试剂盒基于实时荧光RT-PCR技术,用于定性检测禽流感病毒N8亚型(AIV-N8)的RNA,适用于临床样本、环境样本及禽类相关样本的快速检测,为禽流感疫情的诊断和监测提供实验室依据。
产品名称
甲型流感(禽流感)病毒N8亚型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
英文名称
Avian Influenza Virus N8 Subtype RNA Detection Kit (Real-Time RT-PCR Method)
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3063
检测原理
靶标设计:针对AIV-N8亚型基因组高度保守区域设计特异性引物和荧光探针。
扩增与检测:在逆转录酶和DNA聚合酶作用下,病毒RNA经逆转录为cDNA后扩增,探针与靶序列结合释放荧光信号,通过实时监测荧光强度实现定性分析。
试剂盒组成
核心组分:
RT-PCR反应液(含引物、探针、dNTPs、缓冲体系)
逆转录酶混合液
阳性对照(AIV-N8假病毒颗粒)
阴性对照(无核酸酶水)
辅助材料:核酸提取试剂(需单独配置)、说明书、质控证书。
操作步骤
样本处理:按规范提取样本RNA,避免交叉污染。
反应体系配制:按比例混合反应液、酶及模板,每反应建议20μL体系。
PCR扩增:
逆转录:50°C 15分钟
预变性:95°C 3分钟
扩增循环:95°C 15秒 → 60°C 30秒(45个循环,荧光采集于60°C阶段)
结果判读:
阳性:Ct值≤35且扩增曲线呈S型;
阴性:无扩增曲线或Ct值>40。
注意事项
试剂运输需低温避光,-20°C保存,避免反复冻融。
实验需在生物安全二级(BSL-2)实验室进行,废弃物按感染性材料处理。
不同仪器需优化参数,建议使用配套校准品验证。
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