乙型肝炎病毒X蛋白染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称
英文名称
Hepatitis B Virus X Protein Dye-based qPCR Kit
规格
50T
货号
PR2694
产品特点
即开即用：预混优化反应体系，用户仅需提供DNA模板。
高灵敏度：引物经特异性设计，可检测低拷贝数HBV X蛋白基因。
内控设计：含阳性对照，便于排除假阴性结果。
宽动态范围：定量检测线性范围达5个数量级（标准曲线需用户自建）。
兼容性：适配常见荧光定量PCR仪（需SYBR Green通道）。
实验流程
1. 样本准备
提取待测样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL（A260/A280比值1.8-2.0）。
阳性对照：试剂盒内提供HBV X蛋白基因标准品。
2. PCR反应体系
推荐20μL体系：
预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、聚合酶等）
引物混合液
DNA模板（≤2μL）
无核酸酶水补足体积。
3. 扩增程序
预变性：95℃ 3分钟
循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
熔解曲线分析：60℃至95℃，每0.5℃递增。
质量控制
阴性对照：需无扩增曲线。
熔解曲线：单一峰表明产物特异性。
标准曲线：建议使用10倍梯度稀释的阳性对照（10^1~10^5拷贝/μL）。
注意事项
避免反复冻融试剂，分装后使用。
实验环境需无核酸污染，建议使用UDG酶防污染体系。
定量结果需结合标准曲线，单位以“拷贝数/μL”或“相对表达量”表示。
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