解脲支原体染料法荧光定量PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 解脲支原体染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Ureaplasma urealyticum Dye-based Quantitative Real-time PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR2699 |
产品概述
本试剂盒基于染料法荧光定量PCR技术，专用于解脲支原体（UU）核酸的定性与定量检测。适用于男性尿道拭子或女性宫颈拭子样本，辅助诊断泌尿生殖道感染。试剂盒包含优化的反应体系，线性范围达5个数量级，最低检出限为1×10³基因拷贝/mL，并配备无传染性DNA片段作为阳性对照，确保检测安全性。
性能参数
检测类型：定性/定量
线性范围：10²–10⁷拷贝/μL（标准曲线示例）
反应次数：50次（20μL体系/次）
稳定性：标准品-20℃保存6个月，避免反复冻融。
试剂盒组成
PCR反应液：含特异性引物、荧光染料、dNTPs及耐热DNA聚合酶。
阳性对照：无传染性UU DNA片段（1×10⁸拷贝/μL）。
阴性质控品：用于排除污染干扰。
DNA提取液：配套核酸提取试剂。
操作步骤
标准曲线制备（以10²–10⁷拷贝/μL为例）
标记稀释管：标记6管为2–7号，每管加45 μL模板稀释液。
梯度稀释：
7号管加入5 μL阳性对照（1×10⁸拷贝/μL），震荡混匀，得1×10⁷拷贝/μL标准品。
依次转移5 μL至下一管，连续稀释至2号管（1×10²拷贝/μL）。
保存：稀释后标准品立即置于冰上备用。
样本检测
核酸提取：按规范提取样本DNA（建议使用配套自动化提取系统）。
PCR扩增：
反应体系：20 μL（含2 μL模板DNA）。
循环条件：预变性95℃ 2分钟；40循环（95℃ 15秒，60℃ 30秒）。
结果分析：通过荧光阈值（Ct值）及标准曲线计算拷贝数。
注意事项
防污染：标准品稀释需在独立区域操作，使用带滤芯枪头。
样本要求：
分泌物样本室温保存≤8小时，4℃≤72小时，-20℃长期保存。
污染或溶血样本需拒收。
质控：每批次检测需包含阴性质控及内标监控。
适用设备
推荐搭配荧光定量PCR仪（如SLAN-96P）、高速离心机及生物安全柜使用。
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