产品用途
用于定性或定量检测水泡性口炎病毒新泽西型RNA，适用于临床样本、动物组织或培养物的病毒检测。
产品名称 | 水泡性口炎病毒新泽西型染料法荧光定量RT-PCR剂盒 | 英文名称 | Vesicular Stomatitis Virus New Jersey Serotype (VSV-NJ) Dye-Based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3072 |
技术原理
染料法荧光定量RT-PCR：采用特异性引物扩增VSV-NJ的L基因保守区，通过荧光染料（如SYBR Green）与双链DNA结合产生信号，实时监测扩增曲线。
高灵敏度与特异性：引物针对VSV-NJ基因高度保守区域设计，分析灵敏度可达100拷贝/反应，可区分新泽西型与印第安纳型（VSV-IND）。
主要组分
RT-PCR预混液（含逆转录酶、DNA聚合酶、dNTPs等）
特异性引物对
阳性对照（VSV-NJ RNA标准品）
阴性对照（无核酸酶水）
荧光染料
操作步骤
样本处理：提取待测样本RNA，建议使用配套RNA提取试剂盒。
反应体系配制：按比例混合预混液、引物、荧光染料及模板RNA。
扩增程序：
逆转录：50℃ 15-30分钟
预变性：95℃ 2-5分钟
循环阶段（40-45轮）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）
结果分析：
通过阈值循环数（Ct值）定量，标准曲线法计算病毒载量。
定性检测时，Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。
性能参数
灵敏度：100拷贝/反应
线性范围：10^1-10^6拷贝/μL（定量检测）
重复性：批内与批间变异系数（CV）<5%
适用仪器
兼容主流荧光定量PCR仪（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96、LightCycler 480等）。
储存与运输
储存条件：-20℃避光保存，有效期12个月。
运输条件：低温干冰运输。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免RNA降解。
阳性对照需与待测样本分区域处理，防止污染。
若需定量，建议每次实验均运行标准品曲线。
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