猪托克特诺病毒1型（猪细环病毒1型）染料法荧光定量PCR试剂盒

产品概述

本试剂盒采用染料法荧光定量PCR技术，专用于检测猪托克特诺病毒1型（TTSuV-1）核酸，具有高灵敏性、高特异性及操作简便等特点，适用于科研领域（不可用于临床诊断）。

产品特点

即开即用：用户仅需提供病毒样本，无需额外配制试剂。

高特异性：引物基于TTSuV-1保守序列设计，与其他病毒无交叉反应。

高灵敏度：检测限可达数百拷贝/反应。

防污染设计：一管式闭管检测，减少气溶胶污染风险。

稳定保存：-20℃保存，有效期12个月。

试剂盒组成

| 成分 | 规格/数量 | 用途说明 |

| 2×qPCR预混液（含染料） | 500 μL（棕色管） | PCR反应主混合物 |

| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL（黄盖） | 样本稀释或标准品制备 |

| TTSuV-1特异性引物混合液 | 100 μL（白盖） | 靶序列扩增 |

| 阳性对照（1×10⁸拷贝/μL） | 50 μL（红盖） | 标准曲线建立及质控 |

| DNA病毒裂解液（试用装） | 15次用量（9 mL） | 样本核酸提取 |

操作步骤

样本处理

使用配套裂解液提取病毒DNA，溶解于稀释液中备用。

反应体系配制（20 μL/反应）

预混液10 μL + 引物混合液2 μL + 模板DNA 2 μL + 无核酸酶水6 μL。

PCR程序设置

预变性：95℃ 5分钟；

循环扩增（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（荧光采集）；

熔解曲线分析：60℃至95℃，每0.5℃升温。

结果判读

定量分析：通过阳性对照标准曲线计算样本拷贝数。

定性分析：

Ct≤35为阳性；Ct≥40为阴性；35<Ct<40需复测。

注意事项

实验需在无菌环境下操作，避免交叉污染。

阳性对照与样本应分区域处理，防止假阳性。

熔解曲线单峰为特异性扩增，多峰提示非特异性产物。

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