检验原理

采用TaqMan探针法实时荧光PCR技术,通过特异性引物和探针靶向扩增猫疱疹病毒(FHV)的核酸序列,实现对临床样本的病原学检测。
产品名称 | 猫疱疹病毒染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Feline Herpesvirus (FHV) Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR3084 |

试剂盒组成

| 组分 | 25T/盒规格 | 50T/盒规格 |
| 反应液 | 500μL×1管 | 500μL×2管 |
| 酶液 | 25μL×1管 | 50μL×1管 |
| 阳性质控品 | 250μL×1管 | 250μL×1管 |
| 阴性质控品 | 250μL×1管 | 250μL×1管 |
注意:不同批号组分不可混用。
样本处理与检测步骤

核酸提取(样本处理区)
使用磁珠法或离心柱法提取核酸,建议采用配套核酸提取试剂。
试剂配制(试剂准备区)
反应体系(20μL/管):
反应液:19μL
酶液:1μL
分装后加入5μL待测核酸或质控品(阳性/阴性对照)。
PCR扩增
按仪器说明书设置程序,推荐反应条件:
预变性:95℃ 5分钟
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号)
质量控制
阳性质控品:应出现典型扩增曲线,Ct值≤35。
阴性质控品:无扩增曲线(Ct值≥40或无信号)。
样本判定:Ct值≤38且曲线呈S型判为阳性;Ct值>38需重复检测。
注意事项

实验分区操作(样本处理、试剂配制、扩增区),避免交叉污染。
阳性对照含非感染性DNA片段,无需生物安全防护。
若使用其他荧光染料(如EvaGreen),需优化引物浓度(0.3–2.4 μmol/L)及反应温度(60–65℃)。
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