检验原理
本试剂盒基于SYBR Green染料法实时荧光定量PCR技术，针对肉毒梭状芽孢杆菌D型外毒素基因的高度保守区域设计特异性引物。通过荧光信号实时监测扩增过程，实现对目标基因的定性和定量分析。阳性对照可有效区分假阴性结果。
产品名称
肉毒梭状芽孢杆菌D型外毒素基因染料法荧光定量PCR试剂盒
英文名称
Clostridium botulinum Type D Toxin Gene Dye-based qPCR Kit
产品规格
50T
产品分类
荧光定量PCR
检测类型
PCR检测
产品货号
PR3117
试剂盒组分
qPCR预混液：含SYBR Green染料、dNTPs、耐热DNA聚合酶。
引物混合液：特异性扩增D型外毒素基因的引物对。
阳性对照：含D型外毒素基因片段的重组质粒。
阴性对照：无核酸酶水。
操作步骤
样本处理：按标准方法提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL。
反应体系配制：
预混液：20 μL
引物混合液：2 μL
模板DNA：3 μL（阴性对照以水替代）
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析：60℃~95℃，每0.5℃递增。
结果判读
阳性：扩增曲线呈“S”形且Ct值≤35，熔解曲线为单一峰值。
阴性：无扩增曲线或Ct值＞38。
注意事项
实验需在无菌环境下操作，避免交叉污染。
熔解曲线出现多峰可能提示非特异性扩增，需优化条件或重新检测。
本产品仅限科研使用，不可用于临床诊断。
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