人Gremlin1蛋白(GREM1)ELISA试剂盒
产品简介:
人Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA试剂盒用于定量检测人体样本(如血清、血浆、细胞培养上清等)中的Gremlin-1蛋白水平。Gremlin-1是一种分泌型糖蛋白,属于丹吉尔蛋白(DAN)家族,它在胚胎发育、组织修复、炎症反应及多种疾病(如肿瘤、骨关节疾病)中发挥重要作用。
产品名称 | 人Gremlin1蛋白(GREM1)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human GREM1 ELISA Kit |
规格 | 48T/96T | 货号 | A114253 |
检测原理
双抗体夹心法ELISA:微孔板预包被抗人Gremlin-1抗体,样本中的Gremlin-1与生物素标记的检测抗体结合,再与HRP标记的链霉亲和素反应,加入TMB底物后显色,颜色深浅与Gremlin-1浓度呈正相关,酶标仪在450 nm波长处读数。

主要组成
预包被酶标板(96/48孔)
Gremlin-1标准品(多个浓度梯度)
生物素化检测抗体
HRP标记链霉亲和素
底物溶液(TMB)、终止液(硫酸)
洗涤缓冲液、样本稀释液、封板膜等辅助试剂
检测流程
加样:标准品/样本+生物素化检测抗体+HRP标记链霉亲和素
洗涤:每孔加满洗涤液,重复5次
显色:加入底物溶液,避光反应10-15分钟
终止:加入终止液
读数:酶标仪450 nm波长测定OD值
性能指标
检测范围:通常为125-8000 pg/mL(具体以说明书为准)
灵敏度:最小可检测浓度小于62.5 pg/mL
特异性:仅与人类Gremlin-1反应,不与其他相关蛋白显著交叉反应
重复性:板内变异系数≤10%,板间变异系数≤15%
临床与研究意义
骨关节疾病研究:Gremlin-1在骨关节炎、椎间盘退变等疾病中表达异常,参与软骨降解和炎症反应,检测其水平有助于评估疾病进展。
肿瘤研究:Gremlin-1在多种肿瘤(如胰腺癌、前列腺癌)中发挥重要作用,其表达变化与肿瘤侵袭、转移及预后相关。
组织修复与再生研究:Gremlin-1通过调控BMP信号通路影响组织修复和再生过程,检测其水平有助于研究相关机制。
样本要求
血清/血浆:避免溶血和反复冻融。
其他样本:如细胞培养上清、组织匀浆,需经适当处理和稀释。
注意事项
试剂盒需2-8℃保存,有效期一般为6个月。
实验前平衡至室温,严格按照说明书操作。
建议设空白对照、标准曲线和样本复孔,确保结果准确可靠。
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如何验证试剂盒的特异性?(实操建议):稀释线性实验 (Linearity):
操作: 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释(如1:2, 1:4, 1:8...)。
预期: 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系(相关系数 R² ≥ 0.98)。如果线性不好,说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。
干扰实验 (Interference Test):
操作: 在已知浓度的目标抗原溶液中,加入高浓度的潜在干扰物(如高浓度的脂质或结构类似物),检测其对结果的影响。
预期: 若检测值与理论值偏差在±10%以内,说明抗干扰能力强,特异性好。
回收实验 (Recovery Test):
操作: 在样本中加入已知量的标准品,检测总含量,计算回收率。
预期: 回收率在80%-120%之间,说明试剂盒能准确识别目标,不受样本背景干扰。
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