马病毒性动脉炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 马病毒性动脉炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Equine Viral Arteritis Virus (EAV) Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3225 |
产品用途
用于马病毒性动脉炎病毒RNA的快速、高灵敏度检测，适用于科研实验、临床诊断及流行病学调查。
产品特点
高特异性：基于EAV保守基因序列设计引物，确保检测的特异性。
高灵敏度：可检测低至10^2拷贝/μL的病毒RNA。
便捷性：试剂盒包含预混反应液，无需单独配制，操作简便。
兼容性：与常见病毒RNA提取试剂盒兼容，支持多种样本类型（如血清、组织等）。
保存与运输
保存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。
运输条件：低温运输（冰袋或干冰）。
有效期：1年（以包装标注为准）。
实验步骤
样本RNA提取
使用病毒RNA提取试剂盒提取样本RNA，或选用兼容的提取方法。
建议使用试剂盒附赠的RNA裂解液（如适用）。
阳性对照稀释
试剂盒提供非传染性DNA片段作为阳性对照（10^8拷贝/μL）。
按10倍梯度稀释至10^2-10^7拷贝/μL，用于标准曲线制备。
qRT-PCR反应体系配制
在PCR管中加入以下成分（20 μL体系）：
预混PCR反应液（含染料、dNTPs、酶等）
引物探针混合液
模板RNA（或稀释后的阳性对照）
轻柔混匀后离心。
扩增程序设置
逆转录：50℃ 10分钟（如含逆转录步骤）。
预变性：95℃ 2分钟。
循环扩增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40个循环）。
结果分析
根据荧光阈值（Ct值）和标准曲线计算样本中病毒RNA拷贝数。
注意事项
实验分区操作，避免交叉污染（样本制备区、反应配制区、扩增区）。
阳性对照需独立稀释，严禁污染其他试剂或样本。
废弃物品需按生物安全规范处理。
临床意义
马病毒性动脉炎病毒可导致发热、呼吸道症状、生殖道病变及流产（孕马流产率高达90%）。本试剂盒为早期诊断和防控提供可靠工具。
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