马病毒性动脉炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒
商品属性
产品名称 | 马病毒性动脉炎病毒染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Equine Viral Arteritis Virus (EAV) Dye-based qRT-PCR Kit |
规格 | 50T | 货号 | PR3225 |
产品用途
用于马病毒性动脉炎病毒RNA的快速、高灵敏度检测,适用于科研实验、临床诊断及流行病学调查。
产品特点
高特异性:基于EAV保守基因序列设计引物,确保检测的特异性。
高灵敏度:可检测低至10^2拷贝/μL的病毒RNA。
便捷性:试剂盒包含预混反应液,无需单独配制,操作简便。
兼容性:与常见病毒RNA提取试剂盒兼容,支持多种样本类型(如血清、组织等)。
保存与运输
保存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输条件:低温运输(冰袋或干冰)。
有效期:1年(以包装标注为准)。
实验步骤
样本RNA提取
使用病毒RNA提取试剂盒提取样本RNA,或选用兼容的提取方法。
建议使用试剂盒附赠的RNA裂解液(如适用)。
阳性对照稀释
试剂盒提供非传染性DNA片段作为阳性对照(10^8拷贝/μL)。
按10倍梯度稀释至10^2-10^7拷贝/μL,用于标准曲线制备。
qRT-PCR反应体系配制
在PCR管中加入以下成分(20 μL体系):
预混PCR反应液(含染料、dNTPs、酶等)
引物探针混合液
模板RNA(或稀释后的阳性对照)
轻柔混匀后离心。
扩增程序设置
逆转录:50℃ 10分钟(如含逆转录步骤)。
预变性:95℃ 2分钟。
循环扩增:95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(40个循环)。
结果分析
根据荧光阈值(Ct值)和标准曲线计算样本中病毒RNA拷贝数。
注意事项
实验分区操作,避免交叉污染(样本制备区、反应配制区、扩增区)。
阳性对照需独立稀释,严禁污染其他试剂或样本。
废弃物品需按生物安全规范处理。
临床意义
马病毒性动脉炎病毒可导致发热、呼吸道症状、生殖道病变及流产(孕马流产率高达90%)。本试剂盒为早期诊断和防控提供可靠工具。
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