产品简介:

人哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA试剂盒用于定量检测人体样本(如细胞裂解液、组织匀浆等)中的mTOR蛋白水平,是研究细胞生长、增殖、代谢及自噬等生物学过程的重要工具。mTOR是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在细胞信号转导中发挥关键作用,其异常活化与癌症、糖尿病、神经退行性疾病等多种疾病相关。
产品名称 | 人哺乳动物雷帕霉素靶蛋白ELISA试剂盒 | 英文名称 | Human mammalian target of rapamycin |
规格 | 48T/96T | 货号 | A114404 |

检测原理

采用双抗体夹心法ELISA技术:
微孔板预包被抗mTOR抗体,捕获样本中的mTOR蛋白;
加入生物素标记的抗mTOR抗体,结合已捕获的mTOR;
加入HRP标记的链霉亲和素,形成“抗体-mTOR-检测抗体”复合物;
加入TMB底物,酶催化显色,颜色深浅与mTOR浓度正相关,通过酶标仪测定吸光度(OD值)计算浓度。
核心组件

预包被抗体板:已包被抗mTOR抗体的96孔板;
标准品:不同浓度的重组或天然mTOR蛋白,用于绘制标准曲线;
检测抗体:生物素标记的抗mTOR抗体;
酶标记物:HRP标记的链霉亲和素;
底物溶液:TMB显色液;
终止液:用于终止反应,通常为硫酸溶液。
检测流程

加样:加入标准品、样本和检测抗体;
温育:促进抗原抗体反应;
洗涤:去除未结合成分;
显色:加入底物溶液,观察颜色变化;
终止:加入终止液,停止反应;
读数:酶标仪测定OD值,计算mTOR浓度。
应用价值

癌症研究:mTOR信号通路在多种癌症中异常激活,检测mTOR水平有助于研究肿瘤发生机制及评估靶向治疗效果。
代谢疾病研究:mTOR参与调控细胞代谢,其异常与糖尿病、肥胖等代谢疾病相关,检测mTOR水平有助于深入理解疾病机制。
神经退行性疾病研究:mTOR信号通路在神经保护和自噬调控中发挥重要作用,检测mTOR水平有助于研究阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病的病理机制。
自噬研究:mTOR是自噬的关键调控因子,检测其活性或表达水平有助于研究自噬相关生物学过程。
人mTOR ELISA试剂盒操作简便、灵敏度高、特异性强,为相关研究提供可靠支持。
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常见问题与避坑指南:

环节 风险点 避坑建议
试剂使用 混用 严禁混用不同品牌或不同批号的试剂盒组分(如A品牌的包被板+B品牌的酶标二抗),这会导致反应体系崩溃。
终止反应 顺序 加入终止液后,溶液由蓝变黄。此时应尽快读数,因为颜色可能会随时间轻微变化。
保存 剩余板条 未用完的酶标板条,需立即密封,放入自封袋中并加干燥剂,保存于 2-8℃,避免受潮和反复冻融。
环境 污染 避免试剂接触漂白剂或含漂白剂的物质,它们会破坏酶的活性,导致实验失败。
建议:
在购买前,务必查看说明书中的“交叉反应”列表和“样本类型”说明。如果说明书宣称特异性极高(如CR0.1%),
但在你的实际样本中出现了大量假阳性,那可能需要优化洗涤步骤,或者考虑更换抗体特异性更强的试剂盒。
关键字: 人哺乳动物雷帕霉素;靶蛋白;ELISA试剂盒;
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